中文摘要：

单增李斯特菌为重要的食源性人畜共患病原菌，致病力主要取决于其逃离初级和次级吞噬小体的能力及其胞内生活的维持，而吞噬体膜的裂解主要与李斯特菌溶血素(LLO)与磷脂酶C( PC-PLC)有关。为研究LLO 与PC-PLC 在裂解吞噬体膜中的作用及对细菌致病力影响，本项目以具有强溶血溶脂活性的菌株H4为亲本菌株，构建了LLO与 PC-PLC单缺失及双缺失突变株。与亲本菌株相比，突变株对小鼠毒力下降；但不影响对HeLa细胞的粘附及细胞内增殖；对鼠Neuro-2a细胞毒性不显著。细胞空斑试验表明突变株的细胞间迁移能力有不同程度降低。应用转座子突变技术，筛选到8株影响溶脂活性的突变株，发现Tn917插入于prfA结构基因或启动子区域，其对下游基因的调控作用降低，致H4菌株强溶脂活性消失。表明PrfA对PC-PLC的表达具有重要调控作用。体外消化道模型比较了不同血清型菌株在模拟胃肠道环境中的存活率，表明不同血清型菌株致病力差异可能与它们在胃肠道中的存活率差异有关。以上研究为更好地探索该菌的致病机理奠定良好基础。