中文摘要：

本课题在以往的研究成果基础上，对细菌质粒介导的DHA-1型AmpCβ－内酰胺酶的诱导性耐药机制进行研究。确定了质粒上存在调控因子AmpR基因（Genbank注册号EU476911）；表达的6×His-AmpR融合蛋白（34KD），在凝胶阻滞实验产生了明显的"滞后现象"，并可被冷探针竞争性抑制，证实了AmpR酶蛋白可以作为转录调控因子通过与ampC-ampR顺反子（T-N11-A序列TAAGTTTTTCTTT）结合，控制AmpC酶的表达；构建的pACYC184-ampR-ampC载体，导入ampC - 的E.coli DH5α中，重组子获得了AmpC酶诱导性耐药表型，进一步证明ampR与ampC共存同一质粒上，调控AmpC酶的表达；构建AmpR蛋白空间构象模型，其N端存在H-T-H结构域。确定另一阻遏因子AmpD编码基因多数有C-427-A突变，且存在于细菌染色体非质粒上；构建pACYC184-ampD载体，导入E.cloa 029M（持续高产AmpC酶）中，可产生诱导性耐药，说明AmpD与AmpR在DHA-1型质粒AmpC酶的诱导性表达上共同作用。建立了实验室检测AmpC酶的表型方。