以HBcAg呈递弓形虫表位抗原基因形成新型疫苗靶基因Z2,Z3,进行植物密码子优化后,合成序列。克隆进新型植物瞬时高效表达载体PBYR-GFPDsR,构建质粒PBYR-GFP-Z2、Z3,测序、酶切鉴定正确,导入农杆菌LBA4404/GV3101,PCR/酶切确证后,以真空渗滤法/注射渗滤法转染本明烟和豫烟5号,优化烟草无土栽培、转染、表达体系后,提取植物总蛋白, SDS-PAGE、Western-blot分析,以蔗糖密度梯度离心法等进行类病毒颗粒(VLPs)纯化,电镜鉴定,证实弓形虫新型疫苗靶基因Z2,Z3在烟草中高效表达并正确组装成类病毒颗粒。成功构建新型植物瞬时高效快速表达技术平台,该平台可以植物人工气候箱等简易价廉的设备在普通分子生物学实验室便捷实施。进一步以制备的弓形虫嵌合型类病毒颗粒转基因植物疫苗用于动物免疫保护性测试。获国家发明专利授权1项,申请国家发明专利2项,发表论文4篇,国际会议论文2篇,国内会议论文4篇。培养研究生4名,指导本科生完成学士学位论文2篇,培养课外科研本科生14名,指导学生开展校级课题2项,获校级创新实验设计大赛三等奖1项。正在撰写SCI论文2篇。
英文主题词Toxoplasma gondii;Germinivirual vectors;Vaccine; Virus-like Particles(VLPs);Tobacco soilless cultivation system