中文摘要：

血友病A由凝血因子Ⅷ基因（F8）突变所致。对能够表达无功能蛋白的F8基因突变（CRM+）分子发病机制的研究对于阐明FⅧ分子内及分子间的相互作用具有重要意义。本项目拟对本课题组发现的、一种导致CRM+、一期和二期法检测FⅧ:C <1%却无自发出血表现的F8基因His99Arg突变进行研究。通过荧光免疫标记、同位素代谢示踪和Western blot等技术探讨His99Arg和His99Ala突变对蛋白合成与分泌的影响。用离子交换色谱柱分离纯化His99Arg和His99Ala突变蛋白，用改良的凝血检测及荧光共振能量转换等技术，通过对突变蛋白稳定性、凝血酶激活的敏感性及突变蛋白A1和A3亚基Cu依赖和非依赖的结合力的研究，探讨His99Arg突变的分子发病机制及His99在FⅧ的结构与功能中的作用，阐明His99Arg突变导致FⅧ:C检测结果与临床出血程度明显不符的分子机制。