中文摘要：

将弓形虫主要保护性表面抗原P30基因与免疫佐剂霍乱毒素A2及B亚基通过基因重组产生融合基因，用Bacmid杆状病毒表达系统进行真核表达，表达出的融合蛋白作为疫苗的候选抗原成份与免疫佐剂CpG ODN混合，经肌注射、鼻腔滴入及口服等不同途径免疫小鼠，检测免疫效果，以期建立有效的全身及粘膜保护性免疫，从而提高小鼠全身及黏膜保护性免疫，为抗弓形虫感染提供第一道免疫防线，预防弓形虫感染，从而为用于人体弓形虫疫苗的研制及开发提供理论及实验依据，应用前景广阔。预期弓形虫P30与霍乱毒素A2及B亚基组成的融合蛋白抗原可诱导小鼠产生有效的抗弓形虫感染免疫。预期佐剂霍乱毒素与含CpG的ODN可增强亚单位疫苗诱导的全身及黏膜保护性免疫应答，且鼻入及口服接种方式对黏膜保护性免疫的诱导较肌注更为有效。

结论摘要：

弓形虫病是一种广泛存在并危害严重的人兽共患病，至今尚无有效的治疗药物，因此研制安全有效的疫苗极为迫切。DNA疫苗可诱导动物机体产生持久的细胞免疫和体液免疫，相对于传统疫苗具有诸多优势。本研究构建了弓形虫主要表面抗原P30和棒状体蛋白ROP2单基因及复合基因的真核重组表达质粒，并分别与霍乱毒素A2/B亚基和小鼠白介素12基因佐剂联合应用，采用肌肉注射方式免疫小鼠。经检测各项免疫指及小鼠感染后生存率显示复合基因对小鼠的免疫保护性明显高于单基因, 小鼠白介素12对该复合基因疫苗具有明显的免疫增强作用，而霍乱毒素A2/B亚基的免疫增强作用不明显。本研究还成功构建了含复合基因的毕赤酵母表达载体（pGAP-p30-CTX），并在毕赤酵菌GS115中成功表达了p30-CTA2/B复合基因的融合蛋白，为今后从基因水平和蛋白水平进行疫苗研究和诊断试剂开发奠定了基础。以上研究成果为用于人体弓形虫疫苗的研制及开发提供了重要的理论及实验依据。