中文摘要：

运用原子力显微镜(AFM)对人舌鳞状细胞癌组织切片进行高分辨成像，在此基础上进行单个肿瘤细胞核内纳米水平的切割、操纵和分离。通过控制AFM的针尖，能够拾取单个肿瘤细胞的核酸分子，利用PCR、单链构象多态性(SSCP)、比较基因组杂交（CGH）和杂合型缺失检测（LOH）等分子生物学方法进行研究。采用同样的技术对癌旁正常组织细胞进行处理，并将两者结果比较分析。获取肿瘤在发生和演进过程中单个细胞内部核酸分子在时间和空间层次上变化的信息，确定早期肿瘤发生尤其是单细胞起源的基因水平的变化。建立完整的肿瘤细胞原位纳米切割和捕获及分子生物学研究的方法，为探索口腔肿瘤的分子病理学提供新的途径。

结论摘要：

随着对肿瘤分子生物学研究的日益深入，单细胞、单分子水平原位遗传信息分析已经开始成为肿瘤分子诊断研究的一个前沿。因其既能观察又能操纵单分子的独特性质而在生命科学研究中得到了迅速的发展。本研究运用原子力显微镜(AFM)对人舌鳞状细胞癌组织切片和培养细胞进行高分辨成像，在此基础上进行单个肿瘤细胞核内纳米水平的切割、操纵和分离。成像结果显示与电镜相近，局部的分辨能力，例如对细胞表面功能域、细胞内部膜结构的观察等超过电镜。通过控制AFM的针尖，选择合适大小的切割力（100nN～500nN），可以对厚度为70nm或者更厚一些的切片进行分层的精细切割，能够拾取单个肿瘤细胞内的核酸片断，针对拾取的DNA片断的单分子PCR获得成功。建立了完整的肿瘤细胞原位纳米切割和捕获的方法，并探索了对获取的核酸片断进行进一步分子生物学研究的方法，为探索口腔肿瘤的分子病理学提供了新的途径。