中文摘要：

黑老虎（Kadsura coccinea）为五味子科南五味子属植物。我们的初期实验显示，氯仿及乙酸乙酯部分均显示一定的抗肿瘤活性。通过对氯仿萃取物的系统分离，我们发现了结构独特的含有17(20)-ene部分结构的羊毛甾烷类化合物，以及黑老虎特有的含6,9-氧桥的联苯环辛烯木脂素。利用新颖的非洲蟾蜍受精卵动物极细胞分裂抑制模型，结合体外抗肿瘤活性筛选，含有17(20)-ene部分结构的羊毛甾烷类化合物表现了较强的动物极细胞分裂抑制活性，及潜在的抗人癌细胞A549活性。本项目拟在此研究基础上，利用已建立的筛选模型，进一步结合体内抗肿瘤活性筛选，有目的的从具有活性的乙酸乙酯萃取物中分离并鉴定含有17(20)-ene部分结构的羊毛甾烷类化合物以及含6,9-氧桥的联苯环辛烯木脂素。通过考察其抗肿瘤活性数据及其作用机理，总结初步的构效关系。以期从黑老虎中寻找出结构新颖，机制明确的抗肿瘤先导化合物。

结论摘要：

采用多种色谱技术进行分离纯化，综合运用现代波谱学技术(UV, IR, CD, MS和NMR)我们从黑老虎80%丙酮提取物的氯仿及乙酸乙酯萃取液中，分离并鉴定得到了63个化合物，包括2个脂肪酸类化合物，3个甾体类化合物，19个三萜类化合物，35个木酯素类化合物，以及4个其他类型化合物。其中10个新化合物。对乙酸乙酯提取物及相关化合物进行了动物极细胞分裂抑制活性及体外抗肿瘤活性筛选，考察了17(20)-ene结构在其抗肿瘤作用机制和构效关系。首次发现并鉴定了新的具有S-联苯结构的6,9-氧桥联苯环辛烯木脂素类化合物，并通过HPLC-CD方法确认了化合物的立体构型。进行了6,9-氧桥联苯环辛烯木脂素的在不同溶剂中的动力学研究，考察了其在不同溶剂中的稳定性。对6,9-氧桥联苯环辛烯木脂素类化合物CD 谱的特征性规律进行了总结。培养并毕业了2名硕士研究生，发表了SCI文章一篇，国内核心期刊一篇，发表了国内一般刊物一篇。申请了三项发明专利，一项已经获得授权通知。研究结果表明含有17(20)-ene结构的羊毛甾烷三萜类化合物Kadsuracoccinic acid A（20）, Kadsuracoccinic acid A methyl ester （21）和Kadsuracoccinic acid A dimethyl esters （22）显示了较强的抗非洲蟾蜍极细胞分裂活性，并且呈剂量依赖性。化合物20,21和22的IC50 分别为0.68 μM，2.5 μM 和42.1 μM。构效分析表明，17位侧链是起到抑制非洲蟾蜍极细胞分裂活性的必须官能团。并且，羧基是化合物具有抑制非洲蟾蜍极细胞分裂的必要官能团。在体外抗肿瘤实验中，化合物20,21,22及18显示了对A549人肺癌细胞有较强的抑制作用，IC50 分别为是1.2 μM，32.1 μM，50.5 μM和12.2 μM。木质素类化合物均显示了较弱的细胞毒活性，化合物31，39显示了对B16黑色素细胞瘤温和的抑制作用，IC50为45.9μM和70.6 μM。在对木脂素的研究中，我们第一次通过在线HPLC-CD阐明了含有6,9-氧桥联苯环辛烯木脂素的绝对构型。进一步，我们通过化合物在不同的氘代试剂（甲醇，氯仿，DMSO）中的稳定性，考察了含有6,9-氧桥联苯环辛烯木脂素类化合物55和56的动力学数据。