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建立高表达疾病相关基因细胞膜色谱模型筛选中药的活性成分
  • 项目名称:建立高表达疾病相关基因细胞膜色谱模型筛选中药的活性成分
  • 项目类别:面上项目
  • 批准号:30371759
  • 申请代码:H2816
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:2004-01-01-2006-12-31
  • 项目负责人:林蓉
  • 负责人职称:教授
  • 依托单位:西安交通大学
  • 批准年度:2003
中文摘要:

在已往研究血管内皮细胞膜色谱(CMC)模型的基础上,以研究抗动脉粥样硬化(As)药物为例。根据最新理论,CD40-CD40L是As疾病相关基因,阻断CD40-CD40L炎症信号通路为抗As药物作用靶点,建立CD40高表达的CMC模型;对经典抗As中药丹参进行特异性、靶向性筛选,发现其活性成分;再结合体内、体外药理学研究和液相色谱技术,确定丹参中具有特定药理作用的药效物质;并从细胞水平、分子水平阐明其作用的机制;进一步探讨疾病相关基因CD40、特异性筛选模型和药理作用之间的关系。由此证明CD40高表达的CMC模型可用于筛选抗As药物。本课题建立的以疾病相关基因为靶点,先进分析技术为手段的CMC模型,可用于发现中药中新的活性成分或新型先导化合物。适用于与疾病相关的不同基因,进行特异性、多基因、多靶点的研究,从而为中药筛选提供了方法和途径,为中药现代化提供了新思路。

结论摘要:

根据最新理论,CD40-CD40L 是动脉粥样硬化(As)疾病相关基因,阻断CD40-CD40L 炎症信号通路为抗As 药物作用靶点。因此,建立的以疾病相关基因为靶点,先进分析技术为手段的血管内皮细胞膜色谱模型,可用于发现中药中新的活性成分或新型先导化合物。这对疾病相关的不同基因,进行特异性、多基因、多靶点的研究具有重要意义。本研究通过建立CD40 高表达的细胞膜色谱模型;对经典抗As 中药丹参进行特异性、靶向性筛选,发现其活性成分;再结合体内、体外药理学研究和液相色谱技术,确定丹参中具有特定药理作用的药效物质;并从细胞水平、分子水平阐明其作用的机制;进一步探讨疾病相关基因CD40、特异性筛选模型和药理作用之间的关系。结果发现用脂质体法将重组质粒转染ECV-304,可获得CD40高表达的细胞株;用CD40高表达细胞膜色谱模型筛选抗As中药丹参的有效成分,丹参酯溶性和水提取部位中分离得到的成分丹参酮ⅡA﹑丹参酮ⅠA和丹参素则是其有效成分;体内外药理实验显示他们通过CD40而起抗As作用,其筛选模型与药理作用具有一定的相关性。从而为中药筛选提供了方法和途径,为中药现代化提供了新思路。


成果综合统计
成果类型
数量
  • 期刊论文
  • 会议论文
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