本课题借鉴常用于特异性T细胞免疫应答检测的酶联免疫斑点显色和自动斑点扫描方法,建立快速、高通量的新型EV71中和抗体检测方法,与传统方法相比,兼具检测速度快、适于高通量检测、结果可定量化的优点。在抗体标本与病毒作用14小时后即可获得中和抗体效价结果。还将通过对该方法的灵敏度、特异性、重复性、毒株选择性等进行全面性能研究和方法学验证,为该方法的推广应用奠定基础。
Enterovirus type 71;Neutralization assay;ELISpot;High-throughput;
本研究旨在探索建立基于常用于特异性 T 细胞免疫应答检测的酶联免疫斑点显色和自动斑点扫描方法的一种新型的EV71 中和抗体检测方法。该方法与传统方法相比兼具检测速度快、适于高通量检测、结果可定量化的优点。还将通过对该方法的灵敏度、特异性、重复性、毒株选择性等进行全面性能研究和方法学验证,为该方法的推广应用奠定基础。目前,本课题研究工作已成功建立了稳定可靠的具有快速和高通量检测特点的新型EV71中和抗体检测方法,并完成了各项性能研究,同时建立了EV71中和抗体盘。该方法已被充分应用于EV71血清流行病学调查研究、新型EV71抗体诊断试剂研究、中和抗体鉴定与中和单抗盘的建立和EV71预防性疫苗的研究。已为包括中国生物制品检定所、北京生物所在内的多个单位评价EV71疫苗免疫血清标本1900多份次。为EV71 IgM抗体检测试剂盒的研制提供了重要技术支撑。本课题建立的中和抗体快速检测技术同时可以应用于建立包括更多肠道病毒以及其他重要病毒的滴度检测和中和抗体检测方法,具有良好的发展潜力。目前相关成果已正式发表SCI论文3篇,另1篇SCI论文已被接受即将发表,已申请2项发明专利。