中文摘要：

大肠癌转移的发生发展，与转移抑制基因的丢失或低表达密切相关。目前所知道的大肠癌转移抑制基因相当有限，且特异性不高。利用抑制消减杂交和差异筛选技术，已在构建的人大肠癌转移抑制基因消减cDNA文库中，筛选出6个候选新基因片段。本课题拟进一步对6个大肠癌转移抑制新基因片段进行全长cDNA克隆，并根据以上基因在大肠癌不同阶段组织标本中的表达及临床意义，缩小研究对象，确定靶基因。然后对靶基因进行人染色体定位，突变及缺失分析；检测其在不同组织中的分布特异性；此外通过基因转染，观察靶基因对大肠癌细胞转移表型的影响；最后利用免疫组化技术，检测靶蛋白在大肠癌不同阶段组织标本中的表达及临床意义；分别从DNA、RNA和蛋白质水平上初步探讨靶基因在大肠癌侵袭转移中的功能。以期提供大肠癌转移分子机制研究的新线索，并为大肠癌转移预测及靶向治疗奠定理论基础。

结论摘要：

转移是影响大肠癌患者生命和治疗效果的主要原因，新的转移相关基因的功能学研究能为大肠癌转移分子机制提供新的线索。FMNL2是新近发现的一个转移候选基因，其在肿瘤方面的研究未见报道。本研究先检测FMNL2在大肠癌细胞和组织中的表达，发现其与大肠癌发生、转移密切相关。然后观察FMNL2沉默前后大肠癌细胞生物学特性的改变，发现FMNL2能促进大肠癌细胞生长、运动和侵袭。随后探讨FMNL2在Rho细胞运动信号通路的作用，发现FMNL2与RhoA/ROCK信号通路有关，并在LPA诱导的RhoA/ROCK信号通路中发挥重要作用；FMNL2本身作为RhoA的受体蛋白，还能直接影响肌动蛋白的聚合，由此提出FMNL2参与Rho信号通路的新设想。最后利用cDNA芯片检测FMNL2干扰前后差异基因表达情况，并进行初步生物信息学分析，发现使FMNL2表达下调的基因有520个，表达下调的基因有304个，功能分类主要包括细胞运动、生物过程的调控、细胞周期调控、Wnt及凋亡信号通路等。FMNL2可能通过参与Rho信号转导通路影响大肠癌细胞运动，从而促进大肠癌转移，FMNL2可作为一个大肠癌转移预测的有效指标。