中文摘要：

NLRP3基因突变会造成穆-韦二氏综合征等多种自主炎症性疾病，患者多表现有皮肤、关节和眼部的炎症。研究发现，患者体内NLRP3炎症小体过度活化，造成IL-1β等促炎因子的分泌，这是患者体内炎症发生的主要原因。然而，NLRP3突变造成炎症小体活化的分子机制还不清楚。为探明这一机制，为NLRP3突变所导致疾病的治疗提供依据，本项目以NLRP3突变鼠为研究对象，首先通过检测HSP90、SGT1和TXNIP与突变NLRP3相互作用情况及对NLRP3炎症小体活化的影响，探讨已知NLRP3调控因子在炎症小体活化中的作用；其次通过免疫共沉淀实验收集NLRP3蛋白复合物，采用凝胶电泳-质谱分析和Label-free蛋白质组学方法鉴定与NLRP3相互作用的蛋白质，以期找到在NLRP3炎症小体活化中起重要作用的未知蛋白因子。本项研究有望为NLRP3炎症小体介导的感染性和自主炎症性疾病的治疗发现新的分子靶点。

结论摘要：

NLRP3基因突变会造成穆-韦二氏综合征等多种自身免疫病，患者多表现有皮肤、关节和眼部的炎症。研究发现，患者体内NLRP3炎症小体过度活化，造成IL-1β等促炎因子的分泌，这是患者体内炎症发生的主要原因。然而，NLRP3突变造成炎症小体活化的分子机制还不清楚。为探明这一机制，为NLRP3突变所导致疾病的治疗提供依据，本项目利用NLRP3炎症小体的两个重要组分，NLRP3和ASC，的抗体进行免疫共沉淀实验富集了NLRP3和ASC蛋白复合物，通过双向电泳技术分离蛋白复合物并比较了NLRP3基因突变小鼠（KI）与野生型小鼠（WT）来源的两个蛋白复合物组分的差异，发现WT小鼠来源的ASC蛋白复合物中肌酸激酶B1（Creatine kinase B1，CKB1）的量显著高于NLRP3 KI小鼠，提示CKB1可能与NLRP3 KI小鼠体内炎症小体的过度活化有关。siRNA介导的基因沉默实验表明，当CKB1的表达受抑制时，小鼠巨噬细胞分泌的IL-1β的量显著降低，同时不影响TNF-α的分泌。此结果提示，CKB1可能在小鼠NLRP3炎症小体活化中发挥调控作用，该蛋白是否在NLRP3突变导致的炎症小体过度活化中发挥作用还需要进一步验证。