中文摘要：

IFIT4在狼疮患者中高表达且与病情相关，具有重要致病作用。我们的前期实验表明IFNα通过顺序激活PI3K/mTOR－PKCδ-JNK-Stat1而上调IFIT4的表达。MicroRNAs(miRNAs)是不编码的小RNAs,在基因调节中发挥重要的负向调控作用，是目前国际上研究热点。为深入探讨IFIT4的表达调控机制，本项目拟用miRNAs文库和芯片筛选调控IFN上调IFIT4表达的miRNA；生物信息学方法和Northern-blot、qRT-PCR、RPA、luciferase基因报告系统等验证调控IFIT4表达的miRNA及靶位点；构建miRNA的过量表达载体和突变靶基因表达载体转染细胞，或合成miRNA的前体和抑制物，通过上调和下调miRNA后，研究miRNA调控IFIT4表达的信号通路及其在增殖凋亡的作用机制；同时探讨其在狼疮组织中的差异表达。这对探讨狼疮致病机制和寻找靶标。

结论摘要：

系统性红斑狼疮发病机理复杂，I型干扰素通路的异常活化在SLE的发病中起着重要作用。IFN诱导的基因IFIT4在狼疮患者外周血高表达且与病情相关，提示IFIT4重要的致病作用。MicroRNAs(miRNAs)在基因调节中具重要的负向调控作用， 本项目拟探讨microRNA在IFIT4的表达调控机制及功能影响。研究发现前期实验表明狼疮患者与正常人之间外周血淋巴细胞中一组microRNA异常表达，干扰素刺激前后一组microRNA异常表达，miRNA146a在狼疮患者中低表达，与狼疮活动性SLEDAI呈负相关；miRNA21在狼疮患者外周血淋巴细胞高表达，与狼疮活动性SLEDAI呈正相关。在干扰素IFNa刺激下, miRNA146a高表达，miRNA21明显高表达。miRNA21抑制IFIT4和PTEN的表达，加入anti-miRNA21增加IFIT4和PTEN的表达，miRNA146a抑制IFN诱导IFIT4的表达。miRNA21增加IFN诱导的细胞凋亡。在STAT3和p65表达下调或缺失的条件下，IFN刺激后miRNA21的表达明显减少。提示stat3和p65参与IFN诱导miRNA21的表达.同时细胞凋亡明显减少。IFN诱导的AKT的磷酸化、stat3的磷酸化和PI3k亚单位p85的表达.miRNA21对Stat1表达无影响。miR-146a下调IFN诱导的stat1的表达从而下调IFIT4的表达。本项目结果对探讨狼疮致病和诊治分子机制，寻找药靶有重要意义。