中文摘要：

由于各种原因形成的肝硬化，如病毒性肝炎、酒精性肝硬化和脂肪肝等，所导致的肝功能衰竭，至今仍没有理想的药物治疗方法。近年来作为治疗肝硬化的突破点之一，是人工肝支持系统的出现和研究应用。目前，试图利用人肝干细胞或间充质干细胞定向诱导分化为具有功能的成熟肝细胞，治疗或逆转肝硬变是人们的理想愿望，也是本研究立目项的目标。本研究涉及人肝干细胞和间充质干细胞的培养、纯化鉴定、诱导分化等重大生物学事件。以人肝干细胞定向诱导为依据，探索人间充质干细胞是否具有与肝干细胞相类似的分化潜能，为临床应用是否可采用来源于自体的人间充质干细胞资源，以避免移植异体干细胞的不利因素提供科学依据。本研究建立人肝干细胞体外保持未分化状态培养，扩增及建立肝干细胞系是具有世界领先水平的研究工作。人肝干细胞或人间充质干细胞定向诱导分化，替代人工肝内的猪肝将会给肝硬化的治疗带来光明的前景。

结论摘要：

移植干细胞与肝脏再生仍有争议肝干细胞来源和移植干细胞是否在肝脏再生中发挥作用。基于移植干细胞，比较不同组织来源干细胞移植挽救肝硬化的效果。主要内容建立不同组织来源的干细胞系，包括人源的肝干细胞系、脐血干细胞、骨髓间充质干细胞系；体内、外定向诱导分化研究；建立肝硬化实验动物模型；探索基于干细胞的生物人工肝工程化细胞研究。主要研究结果①已建立人源不同组织来源的干细胞系，肝干细胞系、源脐血干细胞和骨髓间充质干细胞系，三种来源的干细胞可长期传代培养，保持干细胞标志CD44、CD147和CD90等。②体外定向诱导分化研究表明，肝干细胞可分化为肝细胞，表达胎甲球蛋白、白蛋白和CK18等；③建立了CCl4大鼠肝硬化/肝纤维化模型。④采用肝内和肠系膜上静脉内移植不同浓度的干细胞，经磁共振、血清学，Western-blot、RT-PCR和形态学检测，证明脐血干细胞和肝干细胞移植可改善肝硬化状态。⑤采用Cytodex组织工程材料尝试建立组织工程细胞，该种细胞体内移植与肝脏亲合性好。结果表明干细胞及生物人工肝起着桥梁作用应用，将有助于急性肝衰竭患者顺利过渡至肝移植，干细胞生物技术将变成有效的治疗选择。