基于最新国际研究动态和协作攻关,本研究超额完成了目标任务。理论上提出了两个新概念(代表性过敏原、广谱性免疫调节剂)和一个设想(抗原平衡刺激设想);技术上发展完善了基因拼接和改良的方法;实践上取得了9项进展从主要过敏原豚草及葎草花粉中克隆了6例泛过敏原基因;可溶式表达并纯化获得原基因的编码蛋白5例,并进行了免疫学鉴定,发现花粉散发高峰期不一致的两个物种来源的重组蛋白间存在交叉反应;通过重叠引物PCR等方法,获得等长的嵌合基因3例并克隆化,生物信息学分析表明,它们的过敏原性得到改变;以抗原性适中的1个克隆为基础,获得二聚体形式嵌合基因1例并克隆化;并进行了可溶性蛋白表达,纯化得到干粉数百毫克;获得不同嵌合形式的三聚体嵌合基因2例并克隆化;其编码蛋白表达纯化正在进行中,预计近期完成与免疫刺激性DNA的偶联工作,理论分析表明,两例三聚体嵌合基因抗原性存在明显差异;通过2名研究生的工作,建立了豚鼠鼻炎模型的复制技术体系;建立了过敏性鼻炎外周血、脐带血等30多例PBMC的体外培养及冻存-复苏培养技术,为已经得到的嵌合蛋白的深入研究铺平了道路;已经发表SCI及核心期刊论文各1篇,获国家发明专利1项
英文主题词Allergenicity; Chimeric Protein; ISS-ODN; Animal Model; Cell Culture