木薯(Manihot esculenta Crantz)是全球重要的粮食与工业原料作物,低温冷害是我国木薯主产区主要的生产问题之一。本研究利用创建的实验群体III(SC24×KU50)、群体I(SC6×面包木薯)和基因组测序基础上获得的SNP标记,通过高通量GoldenGate SNP分析平台,一次性获得455个株系样品1536个SNP标记的多态性数据,构建高密度SNP遗传图谱;并借助SSR锚定引物整合已有3个遗传图谱,创建超过1500个标记的木薯整合遗传图谱。对群体III的245个株系分别在低温生长箱和高纬度试验点进行抗寒性田间鉴定,获取抗寒指数数据,通过QTL软件分析,精细定位抗寒性QTL。结合已有关于淀粉率(SC)、块根产量(FRY)、干物质率(DW)、收获指数(HI)的主效QTL,验证分子标记辅助选择育种程序,为木薯品种改良提供理论依据和技术工具。
Cassava;Cold tolerance;Agronomy traits;Quantative trait location;Methylation
本项目创建了木薯耐寒实验群体III(KU50*SC124)获得186个F1代株系群体,旨在对木薯耐寒性及其主要农艺性状进行QTL标记。项目执行4年,先后将群体种植在广西贺州和海南文昌2个地点,在2011-2013年田间或者温室条件下系统鉴定了群体对低温胁迫的耐受性反应,采用叶片脱落指数、耐寒性指数、恢复指数和相对产量4个耐寒性指数,获得群体变异表型数据;与此同时获取了群体及亲本的块根鲜薯产量、块根条数、块根干物质率和块根淀粉率等4个主要经济农艺性状数据。采用研发的简化重测序基因型分析技术,对群体进行了基因型分析,获取总计57.35万个SNV标记,10.36万个甲基化标记,构建了一个较为完整的遗传图谱,包含4648个多态性标记,覆盖18个连锁群。对其中甲基化位点,首次区分了全甲基化和半甲基化位点,并发现其所涉及的基因及其代谢途径有明显差异,全甲基化基因功能富集于细胞与细胞内组分、细胞生物学过程和代谢过程及催化活性等分子生物学功能。通过对群体III抗寒性、农艺性状表型数据与AFSM多态性基因型数据的比较分析,结果获得1199个可重复耐寒性QTLs,获得1440个可重复高产与农艺性状关联QTLs。进一步对其代谢通路进行解析,在耐寒代谢通路中发现有260个耐寒相关基因,其中转录因子类22个,其中有激素合成代谢途径相关基因,如发现了1个ABA生物合成相关的重复性耐寒QTL基因NCED3(重复次数=3),1个茉莉酸生物合成相关的重复性耐寒QTL基因OPR3(重复次数=2)。在淀粉代谢通路中发现301个产量相关基因,构建了这些基因所在代谢途径分布图。本研究采用改进的基因型分析方法,一次性在木薯中获得耐寒性及重要经济性状关联QTL大量信息,为木薯基因组选择育种提供具有重要价值的标记,并对甲基化和相关代谢途径基因资源进行来挖掘,对于研究其它热带作物具有借鉴价值,取得突出的研究成果。