SARS病毒被鉴定为一种新的冠状病毒,不属于现有的三个组。冠状病毒的感染通常需由其被膜上的Spike蛋白(S蛋白)与宿主细胞膜上的受体的结合。S蛋白决定病毒的宿主特异性并与病毒的毒力密切相关。我们在原核细胞中, 用E.coli成功地表达了SARS病毒的4种主要蛋白N, E, 3-CL, S以及S蛋白的亚单位S1和S2蛋白。纯化蛋白后免疫家兔制备了多种多克隆抗体和单克隆抗体。这些抗体能特异性地与SARS病毒所感染的细胞裂解中的S蛋白结合,可用于S蛋白的致病性研究。我们通过对S蛋白序列、结构的生物信息学分析,挑选了10个S蛋白可能的B细胞抗原表位。所有蛋白都进行了体内体外的抗原性和免疫原性实验。4种S蛋白的B细胞抗原表位(P6,、P8、 P9 和P10)被鉴定,其中P8被认为是一个潜在的血清学检测靶点。利用细胞间融合模型,检查了所有10种多肽及其抗体,发现P8和P9抑制细胞间融合,提示P8和P9可能是抗SARS药物设计的靶点。我们的研究结果将对SARS的治疗和诊断产生重要作用。
英文主题词SARS virus; Spike protein;synthesized peptide;SARS pathogenesis;SARS diagnosis