中文摘要：

用易错PCR法对crtZ和crtW两个基因进行了突变，转化到大肠杆菌BL21菌株中构建出了两个酶的突变库，将两个酶的突变库分成子突变库，通过测定反应体系的吸收光谱计算各反应产物的A466/A456对子突变库进行了初筛和复筛，进行用液相色谱对子突变库进行了鉴定。从754个crtW基因子突变库中筛选、鉴定出能在丙酮/水体系中转化β-胡萝卜素的β-胡萝卜素酮化酶的进化酶库；对875个crtZ子突变库进行了筛选，没有发现能显著改变β-胡萝卜素溶液的A466/A456值的进化酶。因此，对于β-胡萝卜素酮化酶（crtW基因编码的酶），后续应从该子突变库将进化酶筛选出来进行表达及应用研究；对于β-胡萝卜素羟化酶（crtZ基因编码的酶），首先，需要用更灵敏的分析方法对子突变库进行筛选，从中筛选出在丙酮/水体系中具有活性的了突变库，再对子突变库进行分离，从中筛选出进化酶。