利用悬滴法在微液滴中培养溶菌酶和胰岛素酶微晶,获得不同培养条件下多种的蛋白质微晶(单晶)。结合原位显微拉曼技术,改变环境湿度,实现了微晶中各类水分子脱水过程中,蛋白质微晶的原位拉曼观测。发现棒状的溶菌酶单晶具有较高的水含量,当相对湿度由95%下降到86%时,晶体首先失去大量的体相水(占总量的80%),溶菌酶的疏水腔结构没有变化,继续降低湿度由86%到65%,虽然仅有有少量溶剂化水继续失去(15%),但疏水腔结构发生突变。对于胰岛素酶,也发现结构不同的两种微晶(R6和T6),在失水过程中,蛋白分子结构的细微变化。围绕微液滴中的一些物理化学过程,如晶体的形成、相分离、离子对结构、晶体表面结构、相变等基本问题,利用微区拉曼,结合高速摄像,FTIR-ATR等技术,开展了系统研究。
英文主题词lysozyme,insulin, micro-raman