肿瘤干细胞是生物医学领域的研究热点,而迄今尚无专用的分离免疫磁珠。本项目用高分子材料包裹磁性纳米粉成核,再用mPEG-马来酰亚胺在其外面自组装包裹量子点为壳形成核-壳式多功能磁珠,通过马来酰亚胺将其与CD44抗体交联成核-壳式多功能免疫磁珠用于肿瘤干细胞研究。工艺试验确定最佳制备条件,用激光粒度仪、荧光分光光度计研究其粒径大小、分布和荧光特性,用红外光谱、核磁共振、元素分析等确定其化学组成和表面构成。荧光标记、液-质联用等研究其对肿瘤干细胞的靶向特性,确定结合肿瘤干细胞的最佳条件,用活体荧光成像系统检测其体内荧光示踪特性,用自行设计的移动式磁分离装置试验荧光示踪下磁性分离肿瘤干细胞的效果并与目前的方法进行对比。这种核-壳式多功能免疫磁珠可特异性结合肿瘤干细胞表面标志物CD44受体,利用携带的量子点和磁性材料对肿瘤干细胞进行荧光示踪、磁性分离和疗效判断,为肿瘤干细胞的研究提供了新的方法。
Magnetic nanoparticle;fluorescence dyes;muti-functional megnetic bead;cancer stem cells;CD44
肿瘤干细胞是生物医学领域的研究热点,而迄今尚无专用的分离免疫磁珠。本项目用高分子材料包裹磁性纳米粉成核,设计了磁性微球制备新工艺并得到了单分散磁性聚合物微球,再用氧化硅在其外面自组装包裹荧光染料为壳形成核-壳式多功能磁珠,通过硅烷偶联剂活化后形成的氨基将其与CD44抗体交联成核-壳式多功能免疫磁珠用于肿瘤干细胞研究。工艺试验确定最佳制备条件,用激光粒度仪、荧光分光光度计研究其粒径大小、分布和荧光特性,用红外光谱、核磁共振、元素分析等确定其化学组成和表面构成。荧光标记、液-质联用等研究其对肿瘤干细胞的靶向特性,确定结合肿瘤干细胞的最佳条件,用活体荧光成像系统检测其体内荧光示踪特性,用自行设计的移动式磁分离装置试验荧光示踪下磁性分离肿瘤干细胞的效果并与目前的方法进行对比。这种核-壳式多功能免疫磁珠可特异性结合肿瘤干细胞表面标志物CD44受体,利用携带的荧光染料和磁性材料对肿瘤干细胞进行荧光示踪、磁性分离和疗效判断.具有速度快、分离效果好、回收率高且不需要昂贵的带有紫外光发射器的流式细胞仪等优点,将其与流式细胞仪结合进行肿瘤干细胞分选,得到了更好的分离效果。本研究为肿瘤干细胞的研究提供了新的方法。