维生素B12(VB12)是一种重要的咕啉类化合物。目前,基于脱氮假单胞菌开发的好氧发酵工艺已成为国内外工业化生产VB12的主流。然而关于VB12好氧合成途径基因表达调控方面的研究尚无报道。基于脱氮假单胞菌菌株所开发的遗传工具甚少,从而限制了其代谢调控的相关研究。随着生物技术的发展,大肠杆菌由于其遗传工具丰富等诸多优点,已经广泛应用于基因表达调控以及各种医药化合物及化工原料合成的代谢工程研究。本项目将在大肠杆菌5-氨基乙酰丙酸合成途径调控研究的基础上,通过基因组装以及基因组整合在大肠杆菌内构建VB12好氧合成途径,进而系统分析VB12好氧合成途径的基因表达及其中间代谢产物,以解析关键基因及其调控节点。同时,通过多种策略分析各关键基因的优化表达对 VB12合成的影响。该研究结果将为构建高产VB12的工程菌株提供重要的指导作用。
英文主题词Vitamin B12;5-aminolevulinic acid;Escherichia coli;aerobic synthesis pathway;anaerobic synthesis pathway