中文摘要：

动脉粥样硬化（AS）是严重危害人类健康的疾病，单核-巨噬细胞在AS发生中发挥至关重要的作用，其确切机制尚未阐明。资料表明，ox-LDL可诱导巨噬细胞[Ca2+]i 升高，进而影响其诸多功能。但是，通过何种途径介导[Ca2+]i 升高尚不清楚。钙敏感受体（CaSR）是G蛋白偶联受体。本课题组首次证明THP-1源性的巨噬细胞有CaSR表达，用Ca2+和Gd3+激活CaSR，可通过G-PLC-IP3途径使[Ca2+]i 升高和TNFα，IL-1β释放增加，而在AS中CaSR在巨噬细胞中的作用国内外尚无报导。我们推测"CaSR表达增加是巨噬细胞活化和促进AS发生发展的重要环节"。为证实该假说，本文将观察CaSR在ox-LDL处理的巨噬细胞中的表达规律及其对巨噬细胞炎症因子释放和泡沫化的影响及机制。本研究将进一步揭示AS的发生机制，为其有效防治提供新思路和药物作用的新靶点。

结论摘要：

目的探讨钙敏感受体(Calcium sensing receptor, CaSR)在THP-1源性巨噬细胞中的功能，以及对泡沫化过程和分泌功能的影响。方法佛波脂诱导72小时THP-1细胞株分化为巨噬细胞（以下简称THP-1）。形态学观察以及TRAP染色鉴定巨噬细胞分化情况；激光扫描共聚焦显微镜观察CaSR激活后细胞内钙的浓度变化及相关信号通路；免疫印迹以及免疫荧光检测蛋白的表达和细胞定位； ELISA法分析THP-1细胞因子分泌功能的变化；油红O染色以及Dil-ox-LDL荧光观察检测细胞对脂质吞噬情况。结果形态学以及TRAP染色结果证明THP-1细胞成功分化为巨噬细胞； CaSR主要表达在THP-1的细胞浆和细胞膜；高浓度的钙离子和GdCl3可增加细胞内钙，但这一过程可被磷脂酶C抑制剂，内质网钙泵抑制剂毒胡萝卜素，以及CaSR特异抑制剂消除；GdCl3孵育细胞24小时可促进细胞分泌IL-1β、TNFα明显增多，GdCl3以及Callindol通过增加清道夫受体-A的表达促进细胞对脂质的吞噬，这些过程可被NPS2390，Calhex 231抑制，同时还伴有Sirt1表达下降以及NFκB-p65表达增多和激活。结论CaSR在人单核巨噬细胞株THP-1中有功能性表达，激活后可通过降低Sirt1的表达，减少对NFκB信号通路的抑制，进而引起细胞因子释放和脂质吞噬增强。钙敏感受体激活能够影响巨噬细胞泡沫化进程和分泌功能，并借以参与巨噬细胞相关的动脉粥样硬化过程。