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丙型肝炎病毒核心蛋白结合蛋白HCBP1生物学功能的研究
  • 项目名称:丙型肝炎病毒核心蛋白结合蛋白HCBP1生物学功能的研究
  • 项目类别:面上项目
  • 批准号:30471532
  • 申请代码:H1904
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:2005-01-01-2007-12-31
  • 项目负责人:刘敏
  • 负责人职称:教授
  • 依托单位:西安交通大学
  • 批准年度:2004
中文摘要:

我们用酵母双杂交技术筛选到丙型肝炎病毒核心(HCV core)蛋白结合蛋白HCBP1。在体外用免疫共沉淀反应证实HCV核心蛋白与未知功能蛋白HCBP1确有相互结合作用。进一步用pSV40-CAT报告基因共转染细胞观察CAT表达量的变化,发现HCBP1不但与HCV核心蛋白有相互作用,且具有抑制HCV核心蛋白的反式激活作用。HCV core蛋白在细胞凋亡中有重要作用。在此基础上,我们计划应用酵母双杂交

结论摘要:

应用酵母双杂交技术筛选到丙型肝炎病毒核心(HCV core)蛋白结合蛋白HCBP1。在体外用免疫共沉淀反应证实HCV core蛋白与未知功能蛋白HCBP1确有相互结合作用。进一步用pSV40-CAT报告基因共转染细胞观察CAT表达量的变化,发现HCBP1不但与HCV核心蛋白有相互作用,且具有抑制HCV核心蛋白的反式激活作用。为了进一步阐明HCV core蛋白在丙肝相关疾病中的作用机制,我们应用哺乳双杂交细胞在哺乳细胞内证实了两者的相互作用,并探讨了HCBP1的细胞定位及生物学功能。构建HCBP1的绿色荧光表达载体转染COS-7细胞,明确HCBP1的细胞定位,同时构建HCBP1的真核表达载体转染细胞进行细胞周期及细胞凋亡的检测,以了解HCBP1对细胞生长代谢和凋亡的影响,对其生物学功能进行初步的探讨。研究结果提示,HCBP1定位于细胞质中,HCBP1可以增加细胞S期的比例,但不影响G1/G2期的比例。同时还提示,HCBP1的表达没有诱导细胞发生及抑制细胞凋亡的作用,由此推断,HCBP1可能参与细胞的生长代谢路径,HCV core与HCBP1的结合可能引起细胞的代谢异常而发生恶性转化。


成果综合统计
成果类型
数量
  • 期刊论文
  • 会议论文
  • 专利
  • 获奖
  • 著作
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