小鼠脂联素/ACRP30基因剔除对抵抗素表达和代谢的影响-东篱科研大数据发现系统（DRDS）

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小鼠脂联素/ACRP30基因剔除对抵抗素表达和代谢的影响

项目名称：小鼠脂联素/ACRP30基因剔除对抵抗素表达和代谢的影响
项目类别：面上项目
批准号：30370671
申请代码：H0712
项目来源：国家自然科学基金
研究期限：2004-01-01-2006-12-31

项目负责人：杨刚毅
负责人职称：教授
依托单位：重庆医科大学
批准年度：2003

中文摘要：

本项目利用基因剔除技术，塑造脂联素/ACRP30基因敲除小鼠模型。从分子、细胞、组织、胚胎和个体的水平观察了导入突变ACRP30基因所造成的表达模式和特点的改变，从而全面了解脂联素/ACRP30基因的功能。通过扩展胰岛素钳夹技术研究ACRP30基因敲除小鼠体内糖脂代谢和胰岛素敏感性改变，试图阐明该基因在代谢紊乱和胰岛素抵抗中的可能作用机制。由观察在ACRP30基因敲除状态下抵抗素基因表达模式及水平

中文主题词： RNA干扰，腺病毒载体，脂联素，抵抗素，胰岛素钳夹

英文摘要：

Adiponectin, Resistin, siRNA,A

英文主题词： Adiponectin, Resistin, siRNA,A

结论摘要：

近年的研究认为，脂联素/ACRP30可能是一个与糖、脂代谢密切相关的胰岛素敏感性激素。为进一步探讨它在胰岛素抵抗发病机制中的作用，我们设计、合成了3对ACRP30编码基因的反向重复序列，分别定向克隆至载体psilencer1.0的U6转录启动子下游，构建了psi-ACRP30－1，psi-ACRP30－2和psi-ACRP30－3重组质粒，再用KpnⅠ+NotⅠ双酶切上述质粒，并将目的片断亚克隆入穿梭质粒pShuttle，用PmeⅠ线性化穿梭质粒pShuttle-U6-Acrp30-1 和pShuttle-U6-Acrp30-3，并与pAdeasy-1在BJ5183内同源重组，筛选、鉴定、测序后，在XL10-Gold中扩增重组腺病毒质粒，最后在293细胞内包装扩增为重组腺病毒pAd-U6-Acrp30-1 和pAd-U6-Acrp30-3。用此重组腺病毒感染3T3-L1脂肪细胞，用RT-PCR和ELISA检测其Acrp30 mRNA和蛋白表达。最后，将该载体导入高脂小鼠模型，用胰岛素钳夹术评价了糖脂代谢的变化及其对其它细胞因子的影响。

成果综合统计