中文摘要：

肿瘤抑制基因PTEN在多种肿瘤中高频率突变，申请者利用基因芯片分析比较了小鼠PTEN缺失(Pten-/-)的胚胎成纤维细胞和正常对照细胞的基因表达状况，发现分泌性生长因子Pleiotrophin在Pten-/-细胞中和Pten基因敲除小鼠的乳腺癌中高表达。Pleiotrophin的功能同Pten基因敲除小鼠的表型有相符之处，因此申请者拟对PTEN调控Pleiotrophin做深入研究建立人血清中

结论摘要：

本研究首先检测了中国人乳腺癌组织中PTEN和PTN基因的表达情况，发现45例乳腺癌新鲜组织中，31.3%存在Pten启动子CpG岛的甲基化改变，其中64.3%PTEN蛋白表达缺失，50% PTEN表达缺失的乳腺癌存在Pten启动子甲基化；而10例癌旁组织均未检测到Pten基因突变和甲基化；乳腺癌PTN表达率（40.8%）明显高于癌旁对照（10%），其表达与PTEN的表达具有相关性。通过对PTN的启动子区进行分析后确定，小鼠PTN启动子的核心区在转录起始位点-291至-146 bp之间。为了确定PTN的转录调控涉及的信号通路，采用通路特异性抑制剂处理PTEN缺失细胞，又将含有外源性基因的质粒转染进PTEN缺失细胞，结果提示PTN的表达受到PTEN-PI3K-AKT通路的调节。采用RNA干涉技术，建立PTN特异沉默的细胞株，通过研究发现PTN沉默后，AKT通路活性显著降低；PTN稳定沉默的细胞增殖力降低，迁移力下降，裸鼠成瘤力下调，成瘤潜伏期延长。本研究表明PTN与PTEN缺失缺失肿瘤的发生有密切的关系，而我们设计的特异针对PTN基因的siRNA序列在肿瘤基因治疗方面具有潜在的应用价值。