利用体外培养的Sertoli细胞系,通过基因转染(Transfection)实验来寻找能诱导Sox9表达的Wt1基因异构体(Isoform)。然后利用点突变的方法来确定Wt1基因的活性区域。利用具有活性的Wt1异构体转染Sertoli细胞,通过筛选得到Wt1稳定表达的细胞系。构建不同长度Sox9启动子区域和报告基因Luciferase融合的报告载体,然后转染Wt1稳定表达的细胞系,从而确定Wt1基因在Sox9起动子上的调节序列。