中文摘要：

抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）相关小血管炎（AAV）是常见的自身免疫病，发病机理不清。近来有动物研究发现补体旁路途径活化是AAV的发病机制中起重要作用。申请者前期研究发现，在人类少免疫沉积型AAV肾损害的肾组织中，应用直接免疫荧光法检测发现约1/3有补体C3c沉积；进一步应用免疫组化法对没有补体C3c沉积的少免疫沉积性AAV肾损害患者的肾组织标本进行研究，发现所有标本的活动性病变处均能够检测出C3d以及膜攻击复合物（MAC），且C3d沉积部位可以与P因子和MAC共定位，从而说明补体旁路途径的确参与了人类AAV的发病机制。本项目拟进一步研究补体在人类AAV发病机制中的作用，包括在AAV病人的血清、尿液和肾组织中进行补体成分测定；研究ANCA介导的中性粒细胞活化所释放的物质可以导致补体旁路途径活化；补体旁路途径活化之后对中性粒细胞产生的效应，从而为揭示AAV的发病机制中的作用提供理论基础。

结论摘要：

本课题研究补体活化在人类抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）相关小血管炎(AAV)发病机制中的作用以及补体和ANCA所介导的中性粒细胞活化，发现AAV患者外周血循环中存在系统性的补体激活（旁路途径），血浆Bb水平是反应患者全身血管炎活动性和肾脏活动性的生物标志物；在发病机制中起关键作用的是补体C5a及其受体，p38MAPK、ERK、PI3K和PKC四条信号转导通路都参与C5a和ANCA介导的中性粒细胞呼吸爆发和脱颗粒，而这四条通路都是通过控制C5a刺激中性粒细胞使其增加细胞膜表达ANCA靶抗原（特别是蛋白酶3）而实现的；我们应用免疫组化的方法在AAV肾穿组织中对C5a的两个受体即CD88和C5L2进行染色，并研究其与临床病理指标的关系。发现CD88在肾组织的表达下调，而C5L2在肾组织的表达上调；更重要的是，CD88的表达水平与患者初始肾功能及肾间质炎症细胞浸润程度相关，可能成为AAV肾损害的疾病严重程度的生物标志物。本课题研究了抗髓过氧化物酶（MPO）抗体与MPO的相互作用在AAV发病机制中可能的作用，发现不同患者血清中抗MPO抗体可以不同程度的影响MPO的氧化活性，在与抗MPO抗体结合后，MPO的氧化活性与患者肾功能、血管炎活动度评分、抗MPO抗体的亲和力的水平密切相关；在髓过氧化物酶催化的氧化反应之后，髓过氧化物酶的酶活性和抗原性均增强； MPO-ANCA可变区糖基化影响MPO-ANCA与MPO的结合能力和MPO-ANCA诱发中性粒细胞呼吸爆发的能力；在MPO-ANCA-IgG的四种亚型中，MPO-ANCA-IgG3可能具有最强的致病作用，表现为导致PMN呼吸爆发能力更强；更能逆转铜蓝蛋白对MPO的抑制。本课题研究人类白细胞抗原基因与ANCA相关小血管炎疾病易感性及预后的关系，发现HLA-DRB1*1454在AAV患者中的阳性率显著低于正常对照，而DRB1*1101在显微镜下型多血管炎患者中的阳性率显著高于正常对照，HLA-DRB1*1202在抗PR3抗体阳性的韦格纳肉芽肿病患者中的阳性率显著高于正常对照；DRB1*0405 位点可能是治疗抵抗和肾功能预后不良的独立预测因素，DPB1*0402 位点可能是全因死亡的独立预测因素。此外还对ANCA阴性少免疫沉积型血管炎患者补体和中性粒细胞活化进行了研究。本课题共发表SCI论文21篇，累计影响因子67。