蓝藻水华及其毒素不仅对环境造成极大的危害,还影响动物和人类的健康,甚至危及生命,是当今重要的环境问题之一。微囊藻是分布最广的一类水华蓝藻,其产生的微囊藻毒素是分布最广,对人类危害也最大的一类蓝藻毒素。研究、开发微囊藻和产毒微囊藻的监测、分析与预警系统具有十分重要的意义。本项目通过分析不同种属蓝藻的PC-IGS序列,构建系统发育树,确定序列中的保守性位点,设计、筛选了一组可用于微囊藻检测的种属特异性分子探针,建立了检测微囊藻的夹心杂交法。研究结果显示,该方法不受水样中其他生物或非生物组分的干扰,可替代传统的显微镜法;以藻毒素基因簇(mcy)为研究对象,设计、筛选了基于不同mcy基因的两组特异性探针,建立了可用于产毒微囊藻检测的夹心杂交法,检测的灵敏度为100 个细胞/ml。采用多种方法监测淡水湖泊中微囊藻和产毒微囊藻的数量变化,以验证方法的可靠性。研究显示,本项目建立的夹心杂交法灵敏度高,特异性强。与RT-PCR技术相比,该方法具有易操作,成本低等优点,可用于微囊藻和产毒微囊藻的定性定量检测,适于水体水样的常规监测。
英文主题词Microcystis; microcystin; molecular probe; sandwich hybridization assay