观察单抗CD44-生物素(Biotin)-亲和素(Avidin)绑定系统在构建组织工程软骨中能否提高软骨细胞与支架的黏附能力。分别制备软骨细胞二维和三维培养体系,分3组A. 壳聚糖+软骨细胞;B. 生物素+亲和素化壳聚糖+软骨细胞;C.生物素化单抗CD44+亲和素化壳聚糖+软骨细胞。分别测定细胞展平面积、细胞接种脱落率、细胞增殖率,RT-PCR法检测Ⅱ型胶原(Col II)、aggrecan 、sox9的mRNA表达,组织学切片观察壳聚糖支架内细胞黏附生长情况。结果 细胞展平面积、细胞增殖率及Col II、aggrecan、sox9的mRNA表达量皆为C组>B组>A组(P< 0.05)。细胞接种脱落率A组为C组的3.71倍、为B组的2.17倍,而B组为C组的1.71倍,A组>B组>C组(P< 0.05)。组织切片显示细胞在支架内C组增殖旺盛、胞外基质表达较丰富,A组增殖较弱、胞外基质表达较弱,B组介于C与A组间。结论 单抗CD44-Biotin-Avidin绑定系统能显著的提高软骨细胞与支架的黏附能力,促进组织工程软骨种子细胞的增殖和软骨细胞表型的表达。
英文主题词CD44 monoclonal antibody; Biotin; Avidin; Chondrocyte; Tissue engineering