中文摘要：

乙型肝炎病毒（HBV）是一种高变异病毒，加之核苷类似物长期使用或使用不当容易诱发病毒变异和耐药现象，甚至导致诱发暴发性肝炎的发生。暴发性肝炎病情凶险，发病机制不明。以往研究表明纤维介素基因hfgl2高度表达与肝细胞坏死及暴发性肝炎的发生发展密切相关。前期工作显示野生株HBV的C蛋白和X蛋白而非S蛋白可激活hfgl2基因的转录表达，而S蛋白变异后能显著上调hfgl2的转录活性，提示HBV变异可通过进一步激活宿主炎性基因hfgl2的表达而促进肝细胞坏死。本课题拟探讨1.HBV变异对hfgl2基因表达的影响；2.HBV变异影响hfgl2基因表达的分子机制及作用途径，转录调控所必须之顺式作用元件和转录因子。通过研究病毒变异与hfgl2基因表达及肝细胞坏死的关系，阐明暴发性肝炎的分子发病机制，并为其分子干预手段提供靶目标。

结论摘要：

临床上发现乙型肝炎患者抗病毒药物的耐药在一定程度上可导致病情恶化进展，甚至导致肝细胞癌的发生，具体机制不清。乙型肝炎病毒有四个开放阅读框，分别编码HBc、HBs、HBx、和多聚酶P。前期研究显示HBV的野生型HBc和HBx蛋白可以激活重型肝炎相关的凝血酶原酶hfgl2基因转录，促进肝细胞坏死，导致重型肝炎的发生，而野生型HBs蛋白则不能激活该基因。本研究目的是研究变异株HBV是否引致hfgl2基因激活，以及参与激活作用的分子机制，包括顺式作用元件和反式作用因子，以阐述HBV变异与宿主炎性基因表达之间的关系。HBV多聚酶基因P与S基因重叠，临床上常见的拉米夫定耐药变异位点YMDD变异会引起S变异，国外称之为YMDD相关性S变异。变异S蛋白有两种，分别称为rtM204V/sI195M变异和rtM204I/sW196L变异。通过研究，我们发现HBV蛋白变异后形成的YMDD相关性S蛋白变异可以显著上调hfgl2基因的转录，而前C区1896位变异的C蛋白及YMDD变异的RT蛋白则不能激活hfgl2基因的转录。Hfgl2基因是与重型肝炎肝细胞坏死密切相关的凝血酶原酶基因。我们的研究明确了YMDD相关性S蛋白变异即rtM204V/sI195M变异和rtM204I/sW196L变异对宿主炎性基因hfgl2基因有激活作用。进一步，我们通过基因调控的研究方法，深入探讨了在YMDD相关性变异S蛋白影响下，hfgl2基因表达的分子机制和作用途径。通过研究证实，在变异病毒蛋白S作用下，hfgl2基因启动子的-712至-568之间存在着重要的调控元件，且转录因子Ets发挥重要的调控作用。转录因子Ets与其顺式作用元件结合，激活了宿主基因hfgl2基因的转录，促进了肝细胞坏死的发生，因此在一定程度上揭示了重型肝炎肝细胞坏死的分子机制。同时也从病毒蛋白和宿主基因表达的相互关系的角度揭示了HBV病毒变异后，可引起宿主炎性基因表达的改变，因而促进疾病的进展。而转录因子Ets可能成为未来干预重型肝炎肝细胞坏死的分子靶点之一。本项目经过三年的研究（从2010年1月至2012年12月），圆满完成了预期课题计划。目前已发表SCI论文3篇，拟再发表中英文期刊3篇。培养博士1名，硕士3名，参与国际学术交流1次（美国第14次国际感染病学术大会，进行分会场口头发言），国内学术交流3次。