中文摘要：

近年来应激性脑损伤的发生逐年增多，寻求有效的应激防护措施成为人们关注的焦点。本课题组前期研究显示，表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对应激性神经损伤具保护作用，为深入探讨EGCG防治应激性神经损伤的分子机制，本研究拟建立应激动物模型进行EGCG干预，观察信号转导相关分子和蛋白的表达变化，其中重点检测ERK1/2、PI3K/AKT、PKC和STAT等信号蛋白的磷酸化及表达情况。而且，以体外培养应激神经元为研究对象，在细胞水平验证EGCG保护作用的信号转导机制。从而阐明EGCG改善应激性神经损伤的分子机制，确定EGCG对中枢神经系统作用的靶分子，为EGCG作为应激损伤防护药物研究奠定基础。EGCG对信号通路的调节是近年研究其保护作用的热点,但目前相关证据主要来自其抗肿瘤和防治神经退行性疾病研究，未见EGCG对应激性神经损伤信号转导通路的研究报道，本项目在选题和研究内容上具有明显的创新性。

结论摘要：

近年来应激性脑损伤的发生逐年增多，寻求有效的应激防护措施成为人们关注的焦点。本课题组前期研究显示，表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对应激性神经损伤具保护作用，为深入探讨EGCG防治应激性神经损伤的分子机制，本研究建立应激动物模型进行EGCG干预，观察信号转导相关蛋白分子的表达变化，其中重点检测ERK1/2、PI3K/AKT、PKC和STAT等信号蛋白的磷酸化及表达情况。并且，以体外培养应激神经元为研究对象，在细胞水平验证EGCG保护作用的信号转导机制。以阐明EGCG改善应激性神经损伤的分子机制，确定EGCG对中枢神经系统作用的靶分子，为EGCG作为应激损伤防护药物研究奠定基础。结果显示，与正常组相比，应激动物海马及大脑皮质中PKC、ERK1/2、AKT和STAT3信号蛋白的表达水平出现明显降低，而GTPs和EGCG干预组的表达较应激对照组明显增加。另外，应激组信号蛋白的磷酸化水平均较正常组发生显著性降低，而EGCG干预后可抑制其磷酸化水平的降低，差异有统计学意义。细胞实验显示，在皮质酮应激细胞中，ERK1/2、PKC、AKT、STAT3等信号蛋白的表达及其磷酸化水平均较正常组发生明显改变，而0.1μmol/L和1μmol/LEGCG干预可增加应激海马神经元中这些信号蛋白的表达，并抑制其磷酸化水平的降低。另外，我们采用信号通路特异性阻断剂对海马神经元细胞进行干预，进一步验证了PI3K/AKT和ERK1/2在EGCG保护应激神经元损伤中的作用。结果显示，0.1μmol/L EGCG干预能够抑制CORT引起的海马神经元细胞存活率降低。而加入PI3K/AKT特异性阻断剂LY294002后能抑制EGCG的保护作用，海马神经元细胞的存活率降低至（66.90±3.78）%；加入ERK1/2特异性阻断剂U0126也对EGCG的保护作用产生了抑制，海马细胞存活率下降为（62.54±10.22）%，与正常对照组及EGCG干预组相比均有统计学意义。这从另一个侧面也提示信号蛋白ERK1/2和PI3K/AKT参与了EGCG对应激神经元损伤的保护作用。本研究显示，EGCG干预可对脑组织中的不同信号蛋白的表达及其磷酸化水平产生调节作用，这提示相关的信号转导通路参与了EGCG对应激性神经损伤的保护作用。该研究将为天然生物活性物质EGCG进行应激性脑损伤的有效防治提供重要的科学依据。