中文摘要：

内分泌耐药是乳腺癌治疗面临的重要临床问题。microRNAs（miRNA)是近年发现的真核生物体内一类非编码的小分子RNAs,参与了生物各种生命活动的调节，也与肿瘤细胞的耐药性有关。我们前期的研究通过高通量的miRNAs芯片检测MCF7细胞株和三苯氧胺耐药MCF7细胞株（MCF7/TAM)的miRNAs表达谱，发现它们之间21种miRNAs表达有显著差异，再通过qRT- PCR验证。预试验发现miR155在MCF7/TAM中过表达与内分泌耐药有关。所以本研究中我们将通过干预miR155的表达，在体外和体内试验中，观察乳腺癌细胞株对内分泌治疗的敏感性。预测和验证miR155的靶向基因，研究其靶向基因参与乳腺癌内分泌耐药的机制。收集临床内分泌治疗敏感和失败的病例，通过原位杂交和qRT-PCR技术检查石蜡和新鲜组织中miR155的表达与内分泌治疗耐药的关系。本研究为乳腺癌内分泌治疗提供了新思路。

结论摘要：

乳腺癌是妇女最常见的恶性肿瘤，三分之二乳腺癌表现为雌激素受体（ER）阳性，ER促进这些肿瘤的生长和发展。而应用ER调节剂如他莫昔芬(TAM)等药物可以使这群乳腺癌患者受益。但是，有一些妇女却因为原发性或继发性TAM耐药导致了疾病的复发或进展。最近的研究发现小分子RNA(miRNAs)在所有主要的细胞进程中都起了关键性的作用。我们的研究也发现在TAM耐药的乳腺癌细胞株中大部分miRNAs为高表达，尤其是miR155。我们应用高通量microRNA芯片检查MCF-7细胞株和MCF-7他莫昔芬耐药株（MCF-7/TAM）细胞中miRNAs表达谱。MCF-7/TAM细胞中表达miRNAs分子相对于MCF-7细胞多，总体呈上调趋势。这些特点反映了细胞之间存在生物学性质上的差异。 qRT-PCR检测结果同miRNAs芯片检测结果一致。进一步应用Northern blotting实验来验证了这两种细胞株中miR155表达的差别。细胞增殖实验和流式细胞凋亡检测验证了miR155表达异常与TAM的敏感性有关。Western Blotting检测BACH1的表达水平与miR155的表达水平成反比。MiR155靶向抑制BACH1导致4-OH-TAM耐药的机制，可能是通过上调C-Myc的表达引起。细胞增殖和凋亡实验也验证了BACH与TAM耐药有关。原位杂交检查和qRT-PCR检测他莫昔芬耐药的ER+ HER-2+乳腺癌患者的原发乳腺癌标本中miR155的表达水平显著高于TAM敏感的ER+ HER-2-乳腺癌患者。本研究证实了miRNAs参与了乳腺癌内分泌耐药的调控，而且miR155调控TAM耐药是通过调控BACH蛋白的表达来实现。临床病例也证实TAM耐药的患者miR155高表达。