中文摘要：

分别从mRNA和蛋白质水平全面检测新基因Mip1在大鼠心肌缺血-再灌时的时空表达模式；采用基因转染和RNA干扰技术探讨Mip1的心肌细胞保护功能；以绿色荧光蛋白（GFP）为示踪蛋白确定正常和缺氧状态下Mip1的亚细胞定位；Target detection assay技术检测Mip1的DNA结合靶位点；采用cDNA芯片筛选Mip1可能调控的下游基因，并利用生物信息学分析、凝胶阻滞、报告基因分析等方法加以验证。阐释Mip1的心肌细胞保护功能及其作用机制，进一步揭示心肌内源性保护的分子机制，为心肌损伤性疾病的防治提供新的线索和思路。

结论摘要：

本项目主要对心肌缺血预适应相关新基因Mipu1(原名Mip1)的时空表达特性、候选转录因子特性进行了深入探讨，主要发现如下 1、 RT-PCR和Northern检测发现Mipu1广泛分布于大鼠各组织，而在脑组织中表达最高，心肌中表达次之。缺血及再灌注均能诱导Mipu1在心肌组织中高表达。 2、 Mipu1具有抑制过氧化氢所致C2C12细胞LDH释放、细胞凋亡及促进增殖的作用。 3、 Mipu1主要定位于细胞核，并发现其含有多个锌指结构，具有DNA结合活性，经采用随机寡核苷酸文库筛选、EMSA、荧光素酶报告基因等技术证实其结合的DNA核心序列为"CTTA"。 4、 采用生物信息学方法找到Bax等多个启动子区含有"CTTA"核心序列的凋亡相关基因，这些基因可能受到Mipu1的调控。 5、 制备了Mipu1基因敲除小鼠模型、构建了各种Mipu1及其结构域缺失突变体的真核和原核表达质粒、纯化蛋白、稳定表达细胞株等实验材料，为深入研究Mipu1的功能奠定了基础。