中文摘要：

自身免疫性肌病的骨骼肌炎性损伤最终将导致肌组织收缩能力障碍（肌无力），但肌无力是否反馈参与炎性肌病的免疫病理尚缺乏文献报道。本项目拟采用重组骨骼肌C-Protein皮下注射诱导小鼠炎性肌病模型（CIM）。体外培养CIM成肌细胞，FX4000 tension促增殖应力加载刺激，检测成肌细胞的增殖、自身抗原、Toll样受体（TLRs）的表达和释放，对比分析促增殖拉伸应力是否影响成肌细胞自身抗原和TLRs表达；化学干扰（增强或抑制）成肌特定力学增殖信号分子，分析其对CIM成肌细胞自身抗原和TLRs的干扰效应。量化分析人类炎性肌病病理组织中自身抗原、TLRs及成肌增殖信号分子表达差异，明确促增殖力学信号分子与自身抗原及TLRs表达的相关性。通过上述研究，明确骨骼肌收缩功能改变是否干扰肌炎的免疫过程并加速肌纤维的坏死，能否通过调节特定的力学信号分子、或辅以骨骼肌收缩训练，改善炎性肌病的症状和转归。

结论摘要：

炎性骨骼肌损伤将导致肌组织收缩功能障碍，但肌无力是否反馈参与炎性肌病的免疫病理尚缺乏文献报道。为探讨骨骼肌细胞收缩功能的改变是否干扰肌损伤的炎性过程，本课题设计、实施并完成了下述研究工作 1. 体外培养C2C12成肌细胞并进行FX4000 tension力学加载刺激，检测证实10% 幅度, 0.25Hz 频率，2h/d的拉伸刺激明显促进成肌细胞的激活和增殖。拉伸2d时， C2C12细胞内力学信号分子水平显著上调，而自身抗原和TLR3表达则短暂下调，提示应力加载干扰C2C12细胞自身抗原和TLR3的表达。 2. 化学干扰成肌细胞特定的力学增殖信号分子，检测表明特殊的拮抗剂或激动剂显著干扰成肌细胞自身抗原和TLR3的表达，提示骨骼肌应力信号参与对骨骼肌自身抗原和TLR3的表达调节。 3. 进行B6小鼠的Notexin，或Cardiotoxin胫骨前肌（TA）内注射，制备肌损伤小鼠模型。 检测表明，注射后TA肌组织迅速溃变，肌细胞坏死，淋巴细胞渗出，并伴随新生肌纤维的融合和修复，提示成功制备小鼠肌损伤模型。 4. 采用NO促进剂SNP，或抑制剂L-NAME腹腔注射，体内干扰肌损伤小鼠的力学信号分子NO，检测表明，SNP腹腔注射导致单核/巨噬细胞的肌内渗出减少，凋亡细胞数量增加， 自身抗原和TLRs表达下调，TNF-？, IL-6, MCP-1, MCP-3, 和 MIP-1？表达下调。L-NAME的干扰结果与之相反。提示骨骼肌炎症反应过程中上调NO浓度有助于下调肌内炎症反应，促进肌组织再生。 5. 采用Calmodulin激动剂CALP-1,或拮抗剂CCL腹腔注射，体内干扰肌损伤小鼠的力学信号分子Calmodulin，检测表明，CALP-1处理后，损伤的TA肌内单核/巨嗜细胞、T细胞的渗出增加，自身抗原（Mi-2, HRS, Ku-70) 及TLR3表达上调，部分细胞因子（TNF-α, IL-6, MCP-1, MCP-3 and MIP-1α）mRNA表达上调。CCL处理后，上述参数呈现相反效应。提示Ca2+/ Calmodulin信号有助于抑制肌内炎症的发展。 通过上述系列研究，课题组初步证实，部分促增殖的力学信号分子参与介导骨骼肌炎症反应。调节特定的力学信号分子, 或有利于改善炎性肌病的症状和转归。