从黑曲霉糖化酶生产株及其诱变出发株分离糖化酶结构基因及其5'调控区。经序列对比、构建调控区与报告基因的融合载体、黑曲霉转化、转化子报告基因表达水平测试等得出糖化酶结构基因序列保守性对酶活性至关重要,调控区中9个部位碱基改变使转录水平提高一倍,trans调控改变使高产株转录水平提高5-8倍等结论。上述以生产株为材料并通过高低产株对比方式,在逐步阐明诱变导致菌株产酶提高的分子机制的同时,揭示糖化酶基因表达调控规律。这是独特的构思,所得结果丰富了真菌基因表达调控基础研究的信息库,也为丝状真菌分子育种提供直接指导。本项目还用糖化酶启动子和结构基因构建了丝状真菌表达分泌载体,可用于基因工程实践。本项目超计划完成。
Filamentous fungi; Glucoamylase gene; Expression vector