基于MRN复合体在细胞DNA双链断裂修复中的重要意义,本课题拟在前期研究基础上,以大鼠为研究对象,①检测MRN复合体各亚单位在正常不同类型涎腺上皮细胞中的表达分布规律;②观察放疗过程中MRN复合体各亚单位在不同类型涎腺上皮细胞中的时空表达变化规律;③观测MRN复合体功能被干预后,不同类型涎腺上皮细胞放疗敏感性的变化规律;④进而体外细胞培养观察不同类型涎腺细胞在不同辐射剂量照射下MRN复合体各亚单位的瞬时蛋白表达变化规律。通过上述研究,明确MRN复合体在放射性涎腺上皮细胞DNA双链断裂损伤修复中的调控作用,探讨不同类型涎腺上皮细胞放射敏感性差异的分子机制。本项目的完成将为阐明涎腺上皮细胞放射损伤修复的分子机制提供新的依据,有望为涎腺放射性损伤提供新的防治策略。
MRN complex;DSB;salivary gland epithelial cell;irradiated injury and repair;
基于MRN 复合体在细胞DNA 双链断裂修复中的重要意义,本课题首先成功建立大鼠放射损伤模型,然后通过免疫组化,免疫印迹,免疫荧光、聚合酶链反应,蛋白免疫印迹、凋亡、细胞培养等实验方法,检测复合体各亚单位在正常不同类型涎腺上皮细胞中的表达分布规律,以及放疗过程中MRN 复合体各亚单位在不同类型涎腺上皮细胞中的表达变化规律。通过上述研究,发现不同类型涎腺上皮细胞放射敏感性不同,MRN 复合体对放射性涎腺上皮细胞DNA 双链断裂损伤修复有一定的调控作用,这可能为涎腺放射性损伤的防治奠定基础。