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罗氏沼虾两种病毒的感染特性和分子生物学研究
  • 项目名称:罗氏沼虾两种病毒的感染特性和分子生物学研究
  • 项目类别:面上项目
  • 批准号:30370057
  • 申请代码:C010802
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:2004-01-01-2006-12-31
  • 项目负责人:石正丽
  • 负责人职称:研究员
  • 依托单位:中国科学院武汉病毒研究所
  • 批准年度:2003
中文摘要:

前期从患肌肉白浊症状的罗氏沼虾幼虾体内分离到两种RNA病毒颗粒,并克隆了这两种病毒的部分基因组cDNA序列。其中,一种为27nm左右的、具诺达病毒特征的颗粒,一种为15nm左右的未知小病毒颗粒,二者同时感染罗氏沼虾幼苗的肌肉组织和结缔组织。本项目在此基础上,首先用蔗糖密度和氯化铯密度体度超离心方法分离纯化两种病毒,将两种病毒同时和单独感染罗氏沼虾幼苗,确定两种病毒对罗氏沼虾幼苗的感染特性及其相互关

结论摘要:

本项目获得了以下主要研究结果(1)测定了MrNV和XSV中国分离株全基因组序列。(2)用蔗糖和氯化铯密度梯度离心纯化了这2种病毒,并分别或混合感染罗氏沼虾幼苗。对感染后的幼苗进行肌肉白浊症比例和基因组拷贝数进行定量PCR测定后显示,含高浓度MrNV低浓度XSV的病毒悬液感染组出现了较高比率的感染症状,含低浓度MrNV高浓度XSV的病毒悬液感染则只有极少数幼虾出现白尾症状。高浓度MrNV感染组的基因拷贝数显著高于低浓度MrNV感染组。表明MrNV是引起罗氏沼虾白尾病的主要病原。MrNV和XSV基因组拷贝数线性关系显示,XSV是以来于MrNV的卫星病毒。(3)利用昆虫杆状病毒表达系统研究了MrNV的RNA聚合酶基因和XSV基因组的复制关系,从分子水平上证实XSV是依赖于MrNV的卫星病毒。(4)利用昆虫杆状病毒表达系统确定了XSV结构蛋白CP17和CP16的形成是同一基因组独立翻译的结果。同时发现CP17和CP16分别能在大肠杆菌内能可溶性表达,并形成相似的二十面体的类病毒颗粒,而类病毒颗粒的形成与CP17和CP16的羧基端相关,氨基端缺失将影响类病毒颗粒的大小和包装RNA的能力。


成果综合统计
成果类型
数量
  • 期刊论文
  • 会议论文
  • 专利
  • 获奖
  • 著作
  • 2
  • 0
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