本课题运用永生化牙乳头细胞系,加入糖皮质激素建立牙本质形成体外模型,重点探讨①LMP-1在小鼠牙胚发育中的表达特征和诱导成牙本质细胞分化形成矿化结节的能力,弄清LMP-1在牙胚发育及牙本质形成中的生物学作用;②在成牙本质细胞分化过程中,BMP信号分子家族与LMP1之间的生物信息交流,确定BMP信号分子家族中LMP-1的上、下游信号分子;③Cbfa1是否为LMP-1的下游作用分子;④动态观察LMP-1体外诱导矿化的过程,进而选取特定时段阻断LMP-1,从而揭示LMP-1激活后的下游途径。本课题通过深入研究LMP-1在牙胚发育和牙本质形成中的作用及其信号偶联和传导机理,加深对牙本质形成的分子机制的了解和认识,为今后临床上牙损伤修复提供理论指导。
本课题利用体外及体内研究,分别检测了LMP-1在人牙髓、牙周膜、牙龈及唇粘膜中的表达,初步确定了LMP-1在口腔组织中的分布情况;进而检测LMP-1在体外培养的人牙髓细胞分化和矿化结节形成过程中的表达及LMP-1在体内正常及病理状态下人牙髓牙本质复合体中的表达情况,探讨LMP-1在介导牙本质形成中可能发挥的作用;同时检测LMP-1在体外人牙周膜细胞分化及矿化结节形成过程中的表达情况,初步探讨LMP-1在牙周组织中可能发挥的作用;检测LMP-1在各时期牙胚中的表达,初步探讨LMP-1在牙胚发育过程中可能发挥的作用;利用反义寡核苷酸技术阻断LMP-1,检测其下游基因水平的变化及对牙髓成纤维细胞分化及矿化能力的影响探讨LMP-1信号路径机制。