古菌引物合成与延伸的偶联机制及调控规律-东篱科研大数据发现系统（DRDS）

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古菌引物合成与延伸的偶联机制及调控规律

项目名称：古菌引物合成与延伸的偶联机制及调控规律
项目类别：重点项目
批准号：30730003
申请代码：C010202
项目来源：国家自然科学基金
研究期限：2008-01-01-2011-12-31

项目负责人：黄力
负责人职称：研究员
依托单位：中国科学院微生物研究所
批准年度：2007

中文摘要：

本项目以古菌DNA合成过程中引物合成与延伸步骤为切入点，研究引发酶（PriSL）、RFC的作用机制和两者及与其他复制相关蛋白的相互作用，探讨引物合成与延伸步骤之间的偶联机制以及其它复制蛋白、染色体蛋白对这些步骤的影响，增加对古菌DNA复制机制的认识。本项目的主要成果如下（1）发现了硫化叶菌的一个未知蛋白能够代替非催化亚基（PriL）,该蛋白与催化亚基（PriS）共存时，引发活性比PriSL高一个数量级以上；（2）发现PriSL能够催化依赖模版的跨模板合成，提示该酶可能参与DNA双链断裂修复的非同源末端连接途径；（3）完成了冰岛硫化叶菌基因组序列测定；（4）构建了冰岛硫化叶菌Sis10b2，聚合酶B2和B3，拓扑异构酶III缺失突变体；（5）构建了18个编码携His-tag或Strep-tag/His-tag标签复制蛋白基因的冰岛硫化叶菌菌株，获得了这些蛋白的蛋白互作图谱；（6）确定了PriSL中与RFC互作的结构域；（7）分析了单链结合蛋白SSB对PriSL活性的调控作用；（8）发现RFC能够促进DNA聚合酶B1的活性；（9）解析了染色质蛋白Cren7与DNA复合物的晶体结构。

中文主题词：古菌；硫化叶菌；DNA复制；引物合成；引物延伸

结论摘要：

英文主题词Archaea; Sulfolobus; DNA replication; primer synthesis; primer elongation

成果综合统计