久效磷是水域优先控制污染物之一,具有环境雌激素活性,能够影响鱼类的性别分化和生殖功能。原始生殖细胞(PGCs)是具有特殊的繁殖和分化能力并最终产生雌雄配子的细胞,鱼类PGCs的发生是性腺发育和成熟的基础,最终可影响性别分化。课题组的前期研究结果表明,久效磷能够影响斑马鱼PGCs及性腺分化的过程,从而导致生殖细胞数量增多、Vasa基因表达水平提高,引起雌性化效应。但是,到目前为止,关于久效磷影响鱼类PGCs的作用机制尚不清楚。本课题拟采用细胞和分子生物学技术,通过观察久效磷暴露条件下,斑马鱼PGCs形态结构的变化,以及久效磷对斑马鱼PGCs起源、迁移和分布的影响情况,分析这些变化与PGCs及性腺分化的相关关系,探讨久效磷影响斑马鱼PGCs起源、迁移和分化的作用机制,揭示久效磷影响斑马鱼性别分化的作用起点,为环境内分泌干扰物对鱼类性别分化影响研究提供新的思路。
monocrotophos;zebrafish;primordial germ cells;migration;differentiation
本项目采用细胞和分子生物学技术,研究不同浓度的久效磷农药对斑马鱼PGCs起源、迁移和分化的影响及其作用机制。实验结果表明久效磷农药对斑马鱼PGCs的起源没有显著影响。但0.010 mg/L及0.100 mg/L的久效磷农药和0.5μg/L E2均能影响斑马鱼胚胎PGCs的正常迁移。久效磷农药能够引起21、30和42dph斑马鱼幼鱼体内Vasa基因表达水平明显升高,从而对斑马鱼性别决定过程产生影响。久效磷农药暴露斑马鱼幼鱼至40dph,能够通过雌激素作用和毒性作用干扰斑马鱼的性别分化过程。久效磷农药的雌激素作用导致斑马鱼雌性比例随暴露浓度的增大逐渐上升,其中0.100mg/L暴露组雌性比例达到71%,与对照组有显著差异;0.001和0.100mg/L久效磷农药暴露导致斑马鱼出现异常的间性性腺——卵精巢。久效磷农药的毒性作用致使斑马鱼的性腺结构受到损伤,具体表现为卵巢中卵母细胞发生变形,卵巢和精巢内部非细胞区比例增大甚至出现空腔结构等。本项目已发表SCI论文1篇,待发表SCI或核心期刊论文2篇。