中文摘要：

鼓膜穿孔是慢性化脓性中耳炎、耳外伤的主要表现，患者可出现反复耳流脓、听力下降、耳鸣等。自体组织修复鼓膜穿孔虽有一定疗效，但增加手术创伤，且取材有限。我们利用胶原蛋白具有天然的抗拉、抗张性、低抗原性、良好生物相容性及完全的生物可降解性的特点，制备降解速度可控制的复合胶原，将成纤维细胞、血管内皮细胞或稳定表达血管内皮生长因子（VEGF）的转基因成纤维细胞在复合胶原胶原中三维培养，并复合表皮细胞及生长因子，构建不同的组织工程鼓膜；建立鼓膜穿孔动物模型，观察构建的鼓膜组织移植效果；在此基础上，构建人鼓膜组织工程，观察临床移植效果；建立鼓膜组织工程的保存液及保存方法。组织工程鼓膜库的建立将有重要的临床应用价值和社会经济效益。

结论摘要：

鼓膜穿孔常由感染与外伤引起，临床上通常采用鼓膜修补术进行治疗。目前临床用于鼓膜修补的材料可分为自体材料与异体材料，自体材料有颞肌筋膜、耳屏软骨膜、皮肤、脂肪组织等，异体材料多为同种异体材料与生物合成材料。其中自体移植材料是最常用的，成功率高，但是因需要在术中扩大切口，增加了创伤，而对于二次手术病人，则增加了取材的难度。本研究探讨如何以简便快速的方法获得可用于组织工程鼓膜构建的高纯度的鼓膜上皮细胞和成纤维细胞,构建生物组织支架材料，探索构建与培育组织工程鼓膜的方法，建立慢性鼓膜穿孔动物模型后，观察组织工程鼓膜修复鼓膜穿孔效果，在此实验基础上，通过培养血管内皮细胞以及转染有VEGF基因的鼓膜成纤维细胞来构建含血管样结构的组织工程鼓膜，以提高组织工程鼓膜修复鼓膜穿孔效果。研究发现，通过两步组织块培养法可以获得大量高纯度的鼓膜上皮细胞和成纤维细胞，采取脱细胞方法获得的三种不同组织均具有良好的生物相容性，脱细胞猪真皮为佳。采用两种不同材料构建的组织工程鼓膜进行鼓膜修补，均可以使修复的穿孔鼓膜具有与正常鼓膜同样的结构，使用方便，组织工程鼓膜是鼓膜修补的理想材料.