中文摘要：

以不同长度马铃薯Y病毒（PVY）外壳蛋白（CP）基因做重复区（Inverted Repeat，IR），以不同碱基长度的DNA序列为间隔区(spacer)，构建包含不同茎环(stem和loop)长度和比例的、含有或不含内含子（intron）的发夹结构RNA（ihpRNA和hpRNA）基因，转化烟草；研究茎环长度和比例对基因克隆和RNA介导的病毒抗性的产生效率、遗传特点的影响，探索能引发对病毒高抗、并能稳定遗传的最短stem长度；对不同hpRNA或ihpRNA结构引发的病毒抗性的遗传稳定性进行比较研究；为利用RNA介导的病毒抗性策略，培育高抗、多抗和高安全性的抗病毒作物奠定基础。

结论摘要：

以不同长度马铃薯Y病毒（PVY）外壳蛋白（CP）基因做重复区（Inverted Repeat, IR），以不同碱基长度的DNA序列为间隔区(spacer)，构建包含不同茎环长度和比例的发夹结构RNA（hpRNA）的植物表达载体，转化烟草，研究了茎环长度和比例对RNA介导的病毒抗性的产生效率的影响。结果表明当环长度为50bp时，茎长度分别为50bp、100bp和200bp时，均可诱导高频率的病毒抗性的产生，抗性转基因植株的比例为60～80％；当茎长度为25bp时，未获得抗性转基因植株。当茎的长度为50bp时，随着环的长度（50bp、100bp、200bp、400bp）增加，抗性植株的比例减少；当环长度到达400bp时（即茎环比例为18），无抗性转基因植株获得。研究中还探讨了核基质结合区（MARs）和片段的位置对RNA介导的病毒抗性产生的影响，结果表明核基质结合区在一定程度上可提高RNA介导的病毒抗性产生的效率；PVYN-CP基因的3'端比5'端更能有效地诱发病毒抗性的产生。