中文摘要：

本项目以亲和素和生物素衍生物、磷酸二酯酶4(PDE4)与其抑制剂的结合为模型，考察通过分离靶蛋白-配体复合物，实现从含有多个高亲合力微量配体的合成混合物中分离出高亲合力配体，再用HPLC-MS同步定性鉴定和定量测定配体亲合力大小的可行性，从而明确对混合物中不同成分以集群方式进行同步筛选的可靠性；在此基础上，用此集群筛选方法考察从黄芩粗提物、大柴胡汤、大柴胡汤灌胃的兔血清提取物中，快速直接鉴定出PDE4及胰蛋白酶高亲合力抑制剂的可靠性。通过上述研究尝试建立可用于混合物中不同成分同步筛选的集群筛选方法，从而快速直接地从中草药方剂、液相组合合成混合物中鉴定出活性成分和先导化合物，大力促进中医药的发扬光大和液相组合化学技术在药物发现中的应用。

结论摘要：

通过加外标后在均相体系竞争结合反应达平衡,再用磁场分离所形成的靶蛋白-配体复合物,提取靶蛋白-配体复合物中所结合的全部配体,用HPLC-MS分析同步定性和定量测定各种配体相对于外标的结合率,可定量比较可检测配体的亲和力,快速发现未知成分混合物中含量达到一定水平的高亲和力配体,实现对混合物中酶抑制剂、其它配体等潜在药物的集群筛选，提高对混合物库去卷积的效率，显著降低成本，尤其提高发现混合物中高亲和力配体的机会；此技术在链亲合素与生物素衍生物作用体系、磷酸二酯酶4与其抑制剂作用体系得到证实，有望成为混合物中配体类药物快速发现的新技术；同时，优化酶动力学数据分析和抑制类型的决策判断体系，有利于用常规方法快速简便可靠发现药用价值更高的反竞争性酶抑制剂。这些研究结果将显著促进酶抑制剂等配体类药物发现。