哺乳动物三重基序蛋白(TRIM)被证实参与了宿主的抗病毒免疫反应,但有关鱼类TRIM基因的功能研究报道甚少。近期研究表明,从病毒感染虹鳟白细胞中鉴定到多个TRIM基因,属于一个新的TRIM亚家族(finTRIM),推测在鱼类抗病毒免疫中有重要作用。我们对石斑鱼虹彩病毒SGIV感染的石斑鱼脾转录组学研究表明,有40多个EST与TRIM基因有同源性。本项目拟克隆石斑鱼TRIM家族成员(EcTRIMs);qRT-PCR检测其组织分布及SGIV感染后的表达模式,初步确定具有抗病毒作用的EcTRIMs;并通过激光共聚焦显微镜、过量表达、RNAi干扰和免疫共沉淀等方法研究EcTRIM抗病毒作用机制,包括对病毒感染(进入、复制和释放)的影响及对宿主抗病毒免疫基因的调节作用。研究结果不仅能拓宽我们对低等脊椎动物TRIM基因功能的认识,而且为鱼类病害的免疫防治及抗病毒药物研发提供重要理论基础。
哺乳动物三重基序蛋白(TRIM)被证实参与了宿主的抗病毒免疫反应,但有关鱼类TRIM 基因的功能研究报道甚少。我们对石斑鱼虹彩病毒SGIV 感染的石斑鱼脾转录组学研究表明,有多个ESTs 与TRIM 基因有同源性。本项目筛选了4个具有抗病毒作用的EcTRIMs, 包括TRIM39, TRIM8, TRIM25, TRIM13,分析了其基因结构特征及其进化地位;并通过荧光显微镜研究了基因的亚细胞定位特征,及其不同结构域在亚细胞定位中的作用,转染不同结构域的缺失突变重组质粒,或应用RNAi干扰等方法研究了不同EcTRIMs 在石斑鱼虹彩病毒和神经坏死病毒感染过程中的作用机制,包括如何影响对病毒复制以及对宿主抗病毒免疫基因的调节形式。研究结果不仅能拓宽我们对低等脊椎动物TRIM 基因功能的认识,而且为鱼类病害的免疫防治及抗病毒药物研发提供重要理论基础。