胚胎干细胞(ESCs)具有自我更新和多向分化潜能,其相关调控机制的研究对于大量制备干细胞、高效诱导定向分化以用于疾病的治疗、以及了解胚胎发育和肿瘤发生的分子机制等有重要的意义。目前认为,Oct-4和Nanog是维持ESCs多能性的两个最关键内源性分子,但对其信号传递通路还知之甚少,因此找出并明确其相关的调控分子非常必要。本研究我们利用自行设计并建立的随机RNAi文库,以含有Oct-4或Nanog报告基因载体的ESCs作为细胞模型(报告基因为潮霉素和EGFP融合表达蛋白基因),通过转染和筛选,找到了部分可能参与调控ESCs自我更新与分化的信号分子。通过功能实验初步鉴定了筛选到的单个基因对Oct-4和Nanog的调节作用。利用过表达及RNAi等技术手段,对Bmi-1和Nac-1这两个干性分子在ESCs中的作用及功能进行了系统的研究,为相应调控机制的探索及干细胞的临床应用奠定理论基础。
英文主题词ES;Oct-4;Nanog;RNAi library;transcription factors