上皮-间质转化(EMT)参与多种生理与病理过程,但转化机制仍不详。研究发现miRNAs还参与肿瘤转移。 本项目用TGF-β1诱导肺癌细胞EMT,对EMT相关标记蛋白及相关信号通路进行分子鉴定;用MicroRNA芯片比较上皮型细胞及其转化的间质型细胞的miRNAs表达差异,通过荧光定量RT-PCR验证miRNAs差异表达。结果证实TGF-β1诱导肺癌细胞EMT,下调上皮型标记蛋白E-cadherin表达,同时上调间质型标记蛋白Fibronectin或Vimentin表达,还可增加细胞侵袭及运动能力;TGF-β1处理细胞48h后降低p-Akt表达和增加p-Erk1/2表达。然而,PI3K抑制剂LY294002可增加p-Akt表达,MEK1/2 抑制剂 U120却降低 p-Erk1/2表达,同时两种抑制剂均可阻止EMT; miRNAs芯片筛选出一系列EMT相关差异miRNAs,选取表达差异在2倍以上的hsa-miR-33a 和 hsa-miR-193a-3p,并通过荧光定量RT-PCR验证与miRNAs芯片结果符合。本项目的完成为进一步研究肺癌转移的分子机制研究提供新思路。
英文主题词EMT; miRNAs; Lung cancer metastasis