腰背痛是常见而花费巨大的健康问题,椎间盘退变是引起腰背痛的常见原因。椎间盘退变的关键在于椎间盘细胞数量的减少,细胞外基质分泌和椎间盘修复功能的降低,导致了椎间盘内生化构成成分的改变,从而影响了椎间盘的生物力学特性,在负荷作用下引起局部的组织损伤,诱发一系列症状。本研究成功的从含有人GDF-5基因核心序列的质粒pCMV-SPORT6上通过PCR扩增GDF-5,通过穿梭质粒pAdtrack-CMV,在BJ5183和骨架质粒pAdeasy-1同源重组,筛选,包装、扩增后得到含有GDF-5基因的高滴度重组腺病毒Ad-GDF-5。运用Ad-GDF-5对间充质干细胞进行转染,制备出稳定表达GDF-5基因的干细胞。转染的GDF-5基因能够促进转染的干细胞中COL1,ALP,Osteocalcin和Ⅰ型胶原的表达。运用本研究通过手术方法构建出的稳定的椎间盘退变动物模型,在动物体内进行同种异体干细胞与椎间盘细胞移植,能有效延缓椎间盘退变并维持其高度,并能改善椎间盘细胞外基质成分。本研究证实细胞移植能够补充椎间盘内细胞的数量,改善椎间盘生化构成成分,维持椎间盘高度,具备一定的修复退变椎间盘的作用。
英文主题词intervertebral disc; degeneration; gene transfaction; stem cell; transplantation