以BALB/C雌性小鼠卵巢制备小鼠透明带抗原,以其免疫BALB/C雌性小鼠建立免疫性卵巢早衰动物模型。采用缺口末端标记法(TUNEL)检测卵巢卵泡凋亡,原位杂交法检测卵泡Fas、FasL、Bcl-2mRNA和蛋白的表达部位和强度,探讨二者在免疫性卵巢早衰中的作用。并分析其与细胞免疫及体液免疫间的关系。通过补肾养血活血复方左归丸的干预,探讨中药的治疗机理及左归丸对卵巢储备功能、生殖能力的影响,进一步揭示补肾法在调节卵巢功能方面的重要意义。
卵巢早衰(POF)是指女性在40岁前出现卵巢功能衰退,发病率为1-3%,严重影响妇女身心健康。其病因不明,治疗困难,是妇产科界的一大难题。目前主要采用激素替代疗法以改善低雌激素水平引起的各种并发症。但由于替代疗法的副作用(尤其是对乳腺组织的不良刺激),使患者难以长期接受。左归丸具有补肾精、养精血、化瘀血之功,临床治疗卵巢早衰有一定的疗效,但对其相关机理未展开研究。本项目主要进行了以下研究(1)建立免疫性卵巢早衰小鼠模型,分别从免疫调节、细胞凋亡及其相关因子Fas、FasL、Bcl-2、卵巢超微结构等角度探讨POF的发病机制。阐释细胞凋亡在卵巢早衰发病中的意义。(2)以左归丸低、中、高不同剂量干预模型,以泼尼松、己烯雌酚为阳性对照;观察左归丸对免疫功能、卵泡凋亡及卵巢结构的影响。初步论证了免疫性卵巢早衰小鼠免疫功能紊乱,卵泡凋亡增高。左归丸能调节免疫功能,调节凋亡相关因子表达,抑制卵泡凋亡,改善卵巢功能,但各剂量间并未显示明确的量效关系。研究成果有助于进一步揭示卵巢早衰的发病机制,开拓寻找治疗卵巢功能减退相关疾病的有效途径,揭示补肾法在调节卵巢功能方面的重要意义。