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辣椒细胞质雄性不育的分子机理研究
  • 项目名称:辣椒细胞质雄性不育的分子机理研究
  • 项目类别:面上项目
  • 批准号:30370978
  • 申请代码:C1502
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:2004-01-01-2006-12-31
  • 项目负责人:胡开林
  • 负责人职称:教授
  • 依托单位:华南农业大学
  • 批准年度:2003
中文摘要:

以辣椒细胞质雄性不育系及其保持系和F1(不育系为母本与恢复系杂交所得)为材料,采用不连续蔗糖浓度梯度超速离心的方法提取线粒体DNA(mtDNA)。通过对以上3种材料的mtDNA进行RAPD扩增,结合利用限制性内切酶进行酶切图谱比较,找出与辣椒细胞质雄性不育紧密连锁的mtDNA特异片段。将该mtDNA特异片段进行回收,然后进行克隆、分子杂交以及核苷酸碱基序列测定,并将测序结果通过计算机分析,与Gene Bank中已有的植物基因序列进行同源性比较,明确mtDNA特异片段序列中的重复顺序和开放阅读框(open reading frame)。在技术上为建立辣椒细胞质雄性不育的分子标记辅助选择系统以及克隆辣椒细胞质雄性不育基因打基础;在理论上为深入了解辣椒细胞质雄性不育的分子机理提供依据;将对提高辣椒遗传育种的理论研究和实际应用水平具有重要意义。

结论摘要:

以辣椒细胞质雄性不育系及其保持系和F1为材料,采用不连续蔗糖梯度超速离心的方法提取其线粒体DNA(mtDNA)。通过对以上3种材料的mtDNA以及核DNA分别进行了AFLP和RAPD扩增,并将特异片段进行了回收克隆以及核苷酸碱基序列测定,将测序结果通过计算机分析,与Genbank中的基因序列进行了同源性比较。结果表明,辣椒mtDNA特异片段A-TAG /T-AAC-a265 与矮牵牛和烟草mtDNA中ORF25基因的核苷酸序列相似性分别达到98%和97%,与胡萝卜ATP8基因和细胞色素b基因(cob gene)的碱基序列相似性分别达到91%和88%。初步认为辣椒mtDNA特异片段A-TAG /T-AAC-a265可能与辣椒CMS有关。辣椒核DNA特异片段OPV-021000与热击蛋白70基因的核苷酸序列相似性达到98%,蛋白质编码序列相似性达到100%。初步认为该片段与辣椒CMS的育性恢复有关。此外,建立了良好的辣椒离体培养再生植株的体系,并对辣椒进行了外源目的基因(CMV-CP)基因)的转化研究。为以后克隆的辣椒细胞质雄性不育以及以及育性恢复相关基因的功能鉴定奠定了基础。


成果综合统计
成果类型
数量
  • 期刊论文
  • 会议论文
  • 专利
  • 获奖
  • 著作
  • 9
  • 1
  • 0
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  • 1
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