内源性激素类兴奋剂分析检测新方法的研究-东篱科研大数据发现系统（DRDS）

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内源性激素类兴奋剂分析检测新方法的研究

项目名称：内源性激素类兴奋剂分析检测新方法的研究
项目类别：重点项目
批准号：20335010
申请代码：B05
项目来源：国家自然科学基金
研究期限：2004-01-01-2006-12-31

项目负责人：李元宗
负责人职称：教授
依托单位：北京大学
批准年度：2003

中文摘要：

内源性激素类是目前运动员滥用严重而又难以检测的兴奋剂。本项目针对肽类(重组人体生长激素rhGH和重组促红细胞生成素rhEPO)及内源性类固醇类(睾丸酮、双氢睾丸酮和去氢表雄酮等)研究有效的分析检测方法。rhGH在体内的生理功能主要是通过人胰岛素样生长因子(IGF)作为媒介完成的。血液中95%的IGF以3种蛋白质复合物形式存在，其在血液中的浓度与rhGH浓度直接相关，但前者更易检测。本项目将利用分子

中文主题词：反兴奋剂；IGF-I；EPO；CE-MS；类固醇

英文摘要：

anti-doping;IGF-I, EPO；CE-MS，s

英文主题词： anti-doping;IGF-I, EPO；CE-MS，s

结论摘要：

针对内源性激素类兴奋剂的检测问题，利用基因重组和蛋白质工程技术制备了带有六聚组氨酸标签的IGF-I和增强型绿色荧光蛋白 (EGFP) 融合的IGF-I。融合蛋白保持了免疫学和生物学活性。利用这些融合蛋白建立了4种新型的免疫分析IGF-I的方法。其中最低检测限为1.6×10-8 M，生长激素滥用者血清样品中IGF-I的水平在检测的线性范围内。为进一步提高检测灵敏度，还制备了β-半乳糖苷酶融合的IGF-I，正在将其用于IGF-I的检测。发展了用于CE毛细管涂层材料的聚阳离子和羧甲基壳聚糖材料，可成功分析EPO的微多相性；建立了CE-MS在线联用方法，可有效分离和鉴定内源性和重组EPO，但检测灵敏度尚需提高；建立了分离鉴定EPO酶解产物的CE-MS方法；初步研究了CE-LIF检测EPO的方法。为发展GH和EPO的检测新方法，设计构建了高灵敏QCM生物传感分析平台，并对该平台的性能进行了评价。制备了3种以睾酮为模板分子的新型分子印迹材料，可用作分离识别睾酮的SPE填料或LC固定相。将离子液－盐－水和异丙醇－盐－水两种双水相体系用于尿液中类固醇的富集分离和HPLC测定。

成果综合统计