在针对细粒棘球蚴虫病的研究中,无论是开展分子疫苗、研制其具有早期诊断价值的抗原分子,还是筛选新型药物治疗作用的靶标分子,都需要对其病原体蛋白构成情况进行全面的了解。蛋白质组学技术由于其所具有的高通量和便捷的操作使其成为解决上述问题最佳的方法。本研究将通过2D电泳、图象采集和分析、蛋白样点的切割和纯化和时间质量飞行质谱仪(MALDI-TOF)的分析对细粒棘球蚴虫原头蚴、囊液和囊壁的蛋白质组学进行研究,弄清楚它们的蛋白质构成情况,并比较分析它们之间的差异。结合生物信息学技术,将我们获取的蛋白质数据与互联网上公共蛋白数据库进行配比分析。最终建立细粒棘球蚴虫的蛋白质基础数据库。希望通过上述研究,对细粒棘球蚴虫的蛋白质构成情况有一个全面的了解,并为更广泛的筛选疫苗候选分子、具有早期诊断价值的抗原分子和新型药物作用的靶蛋白提供理论依据。
Echinococcus granulosus;Proteomic;Two-dimensional electrophoresi;MALDI-TOF MS;Protein database
本研究旨在通过双向电泳及MALDI-TOF MS质谱技术分析细粒棘球蚴虫原头蚴、囊液和囊壁的蛋白质的基础构成,为筛选分子疫苗、具有诊断价值的抗原分子和药物治疗作用的靶标分子提供理论依据。结果显示从原头蚴、囊壁和囊液的双向电泳中分别分离到330、107和30个蛋白点。并初步鉴定了细粒棘球蚴原头蚴、囊壁和囊液中的部分蛋白点,其中,原头蚴中共有49个蛋白点,囊壁中有13个蛋白点,囊液中有3个蛋白点。利用原头蚴重组蛋白制备抗体,在细粒棘球蚴原头蚴的双向电泳图谱上标记了三个已知蛋白靶标。囊液中元素以钠、钙、钾、镁为主;铜、锌次之;铁、铬、镉、硒含量趋近于0。 囊液中的大部分生化指标均低于人体正常血清值,而谷草转氨酶、谷丙转氨酶这两种酶活性较高,且比值高于人体正常血清值。囊液中游离氨基酸种类较丰富,以丙氨酸、甘氨酸、缬氨酸为主,而天门冬氨酸含量趋近于0。